Ritlecitinib (PF-06651600) 是一種口服有效的，選擇性的 JAK3 抑制劑，IC50 值為 33.1 nM。

 

 

 

 

　　體外研究

 

　　Ritlecitinib是一種強效的JAK3選擇性抑制劑，可以以IC50值為33.1 nM抑制JAK3激酶活性，但對JAK1、JAK2和TYK2沒有活性（IC50>10,000 nM）。Ritlecitinib以IC50值分別為244 nM、340 nM、407 nM和266 nM抑制由IL-2、IL-4、IL-7和IL-15誘導的STAT5磷酸化。Ritlecitinib以IC50值為355 nM抑制由IL-21誘導的STAT3磷酸化。在T細胞分化實驗中的功能評估表明，Ritlecitinib通過IFNγ測量可以抑制Th1和Th17分化，并且在Th1條件下經(jīng)過5天和Th17條件下經(jīng)過6天時，IL-17生產(chǎn)的IC50分別為30 nM和167 nM。Ritlecitinib還通過抑制先前分化和休養(yǎng)后經(jīng)PF-06651600處理的細胞中的IFNγ產(chǎn)生（IC50=48 nM）和IL-17產(chǎn)生（IC50=269 nM），抑制了Th1和Th17的功能。

 

　　體內(nèi)研究

 

　　在大鼠佐劑誘導的關(guān)節(jié)炎（AIA）模型中，Ritlecitinib以無結(jié)合態(tài)EC50為169 nM減輕了爪腫脹。同樣，在實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）小鼠模型中，Ritlecitinib以治療劑量30或100 mg/kg以及預防劑量20和60 mg/kg顯著降低了疾病嚴重程度。這兩個嚙齒動物模型中Ritlecitinib的療效，說明JAK3選擇性抑制足以在人類疾病中產(chǎn)生疾病改變效應(yīng)。

 

 

　　細胞檢測

 

　　為了研究PF-06651600對分化后的Th17細胞的影響，偏向于Th17的細胞經(jīng)洗滌后，在培養(yǎng)基中休息過夜，并在沒有抗CD3或抗CD28抗體的條件下，懸浮在含有與分化過程中相同濃度細胞因子的培養(yǎng)基中，同時加入10種不同濃度的PF-06651600，繼續(xù)培養(yǎng)2天。第9天，收集每個孔的上清液，并測定其中的IL-17A

 

　　動物實驗

 

　　通過治療性給藥方案，在大鼠誘導性關(guān)節(jié)炎模型中評估PF-06651600對JAK3的抑制作用。當單個后爪體積測量顯示其中一個后爪增加了0.2毫升或更多時，將動物隨機分配到不同的治療組。每日通過口服給予PF-06651600進行治療。實驗1的治療組劑量為：80、15或6毫克/千克的PF-06651600或載體（2% Tween 80/0.5% 甲基纖維素/去離子水）。實驗2的治療組劑量為：30、10和3毫克/千克的PF-06651600或載體（0.5% 甲基纖維素/去離子水/1 mEQ 鹽酸）。實驗3的治療組劑量為：10、1、0.3和0.1毫克/千克的PF-06651600或載體（0.5% 甲基纖維素/去離子水/1 mEQ 鹽酸）。治療持續(xù)7天。