Doramapimod 達(dá)馬莫德是一種具有口服活性的，高效的 p38 MAPK 抑制劑，IC50 值分別為 p38α=38 nM，p38β=65 nM，p38γ=200 nM，p38δ=520 nM。Doramapimod 對 p38 激酶具有皮摩爾親和力 （Kd=0.1 nM）。Doramapimod 也抑制 B-Raf 和 Abl，IC50 分別為 83 nM 和 14.6 μM。

 

 

 

　　體外研究

 

　　Doramapimod （BIRB 796）通常與炎癥有關(guān)，因為它在t細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生中起作用。

 

　　Doramapimod 達(dá)馬莫德阻斷應(yīng)激誘導(dǎo)的支架蛋白SAP97的磷酸化，進(jìn)一步證實這是SAPK3/p38γ的生理底物。Doramapimod與p38 MAPKs或JNK1/2的結(jié)合損害了上游激酶MKK6或MKK4對它們的磷酸化作用。

 

 

　　體內(nèi)研究

 

　　Doramapimod （BIRB 796）的平均移植重量比對照組輕。Doramapimod的抑制率為1.93%。

 

　　Doramapimod （BIRB 796）治療在第7周輕度降低血壓（166±7 mm Hg）；P<0.05），而SD大鼠血壓正常（123±3 mm Hg）。盡管血壓降低，但未經(jīng)治療和經(jīng)doramapmod治療的dtgr具有相似的心臟重量和心臟肥厚指數(shù)（心臟與脛骨的比值），與非轉(zhuǎn)基因SD大鼠相比顯著更高（分別為310±6、307±6和206±5 mg/cm）；P < 0.05）。

 

 

　　細(xì)胞試驗

 

　　人類胚胎腎（HEK） 293和海拉細(xì)胞暴露于0.5山梨糖醇為30分鐘或100 ng / mL EGF 10分鐘，然后細(xì)胞溶解在緩沖（50 mM Tris-HCl, pH值7.5,1毫米EGTA, EDTA 1毫米，1毫米原釩酸鈉，氟化鈉10毫米，50 mM鈉β甘油磷酸鹽、焦磷酸5毫米，0.27蔗糖，0.1毫米phenylmethylsulfonyl氟化物，1% （v / v）特里同x - 100） + 0.1% （v / v） 2-mercaptoethanol和完整的蛋白酶抑制劑混合物。裂解液在4℃下18000 × g離心5min，取下上清液，在液氮中速凍，-20℃保存?zhèn)溆�。根�?jù)需要，將細(xì)胞在無10 μM SB 203580或10 μM PD 184352或不同濃度的Doramapimod中預(yù)孵育1小時，孵育時間見圖。

 

　　MCE尚未獨立證實這些方法的準(zhǔn)確性。僅供參考。

 

　　動物實驗

 

　　老鼠

 

　　采用6 ~ 8周齡，體重18 ~ 24 g的胸腺裸小鼠（BALB/c-nu/nu）。小鼠給予Doramapimod （10 mg/kg，每3次days×5）治療。每3天記錄動物體重和兩個垂直的腫瘤直徑（A和B），并估計腫瘤體積（V）。

 

　　Rats

 

　　使用雄性轉(zhuǎn)基因dtgr （RCC Ltd）和年齡匹配的非轉(zhuǎn)基因Sprague-Dawley （MDC）大鼠。執(zhí)行2種不同的協(xié)議。在方案2中，未經(jīng)治療的dTGR （n=15）， dTGR+BIRB796 （30 mg/kg /天，持續(xù)3周；n=11）， SD大鼠（每組n=8）。每周用尾袖測量收縮壓。從第5周至第7周在代謝籠中收集24小時尿液樣本。第7周采集血清。臨床常規(guī)測定血清肌酐和胱抑素C。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定尿大鼠白蛋白。方案2的目的是關(guān)注電生理改變和死亡率。未治療的dTGR （n=10）、dTGR+BIRB796 （n=10）和SD （n=10）大鼠被研究至第8周。