小鼠抗體的分類及生產(chǎn)技術(shù)介紹
小鼠抗體是科研實(shí)驗(yàn)中常用的一種抗體，它主要有IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM五種類型，下面小編就小鼠抗體分類及使用實(shí)驗(yàn)室儀器進(jìn)行小鼠抗體生產(chǎn)技術(shù)做一下簡單介紹：
小鼠抗體同種型/類、亞類和小鼠抗體同種型
與人類相同，小鼠有五種抗體同種型（IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM）。每個同種型都有不同的重鏈。同種型也稱為類�？贵w的另一個名稱是免疫球蛋白，因此后綴“Ig”表示抗體類別和亞類。幼稚 B 細(xì)胞產(chǎn)生 IgM 和 IgD。在 B 細(xì)胞成熟過程中，通過同種型轉(zhuǎn)換，成熟的 B 細(xì)胞將產(chǎn)生 IgG、IgA 或 IgE 同種型和亞類中的一種。不同的同種型在體內(nèi)具有不同的半衰期，從 12 小時到 8 天不等 。
小鼠同種型基因
每條重鏈由可變區(qū)和恒定區(qū)組成。恒定區(qū)被指定為不同的基因，盡管它們僅構(gòu)成免疫球蛋白重鏈的一部分。
對于 IgG2a 和 IgG2c 同種型：具有 Igh1-b 等位基因的近交小鼠品系具有 IgG2c 同種型，而不是 IgG2a 。除其他同種型外，鼠類重鏈基因座僅具有這兩種同種型基因中的一種。小鼠 IgG2a 支架有時用于重組抗體表達(dá)。
表 1 列出了小鼠抗體類別、子類、基因名稱以及 NCBI 和 IMGT 基因數(shù)據(jù)庫的鏈接。
表 2 列出了實(shí)驗(yàn)室中一些常用動物物種的不同同種型和亞類基因組。IgG2a 在某些小鼠品系中不存在，例如 C57BL、SJL 和 NOD 小鼠，它們具有 IgG2c。
小鼠抗體分子量
IgA、IgD 和 IgG 的重鏈具有一個具有三個免疫球蛋白 (Ig) 結(jié)構(gòu)域的恒定區(qū)。例如小鼠IgA重鏈恒定區(qū)有344個氨基酸，小鼠IgG1恒定區(qū)有324個氨基酸。其他類型的重鏈可能具有不同數(shù)量的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。例如，分泌型和膜結(jié)合型 IgD 重鏈恒定區(qū)有兩個 Ig 結(jié)構(gòu)域。IgE 和 IgM 的重鏈有一個帶有四個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的恒定區(qū)。小鼠 IgM 重鏈恒定區(qū)有 475 個氨基酸。來自所有同種型的重鏈都有一個帶有單個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的可變區(qū)。
每個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域長約 110 個氨基酸。每條IgD和IgG重鏈約450個氨基酸，每條IgE和IgM重鏈約550個氨基酸。每條輕鏈（kappa 或 lambda）都有一個恒定的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域和一個可變的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，大約有 211 到 217 個氨基酸。常見的 IgG 同種型的分子量為 150 KD。在還原條件下，每條重鏈約為50 KD，每條輕鏈約為25 KD。IgM 往往以五聚體或六聚體形式存在，其中 IgM 分子通過二硫鍵共價連接，從而產(chǎn)生 970 KD 的分子量。由于免疫球蛋白是糖基化的，因此表觀分子量可能與標(biāo)稱分子量不同，有時甚至區(qū)別較大。
小鼠抗體生產(chǎn)
小鼠是單克隆抗體產(chǎn)生的主要動物宿主，也是多克隆抗體產(chǎn)生的宿主。小鼠單克隆抗體生產(chǎn)也會涉及到實(shí)驗(yàn)室儀器、實(shí)驗(yàn)耗材及一些科研試劑。比如：用外源抗原以及常用的弗氏佐劑或新型水溶性 QuickAntibody對小鼠（通常是BALB/c小鼠， 進(jìn)行免疫。小鼠單克隆抗體也可以通過將來自特定小鼠品系的未免疫脾細(xì)胞與自身抗體融合直接獲得，如抗 SM Y12 抗體的情況。其他菌株，如 C57BL/6 、NMRI、C3H 和 SJL，以及其他佐劑如殼聚糖、LQ 或不完全弗氏佐劑，以及過表達(dá)免疫原的埃文細(xì)胞，也可以使用�；蚬こ绦∈笃废狄部梢宰鳛樗拗鏖_發(fā)特異性抗體，例如通過β3Gn-T5基因敲除小鼠開發(fā)了一種對GM3神經(jīng)節(jié)苷脂具有高結(jié)合特異性的IgG單克隆抗體。
截至2022年6月5日，科研數(shù)據(jù)庫列出了針對12039個人類基因、7144個小鼠基因、6475個大鼠基因以及來自其他156個物種的11079個基因的254742個小鼠單克隆抗體。
大多數(shù)單克隆抗體是在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的。通常使用抗小鼠二抗。 二抗多數(shù)為山羊抗小鼠。
蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司提供的實(shí)驗(yàn)室儀器，實(shí)驗(yàn)耗材，生化試劑等廣泛用于抗體紙杯、抗體生產(chǎn)等工藝。
小鼠抗體同種型/類、亞類和小鼠抗體同種型
與人類相同，小鼠有五種抗體同種型（IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM）。每個同種型都有不同的重鏈。同種型也稱為類�？贵w的另一個名稱是免疫球蛋白，因此后綴“Ig”表示抗體類別和亞類。幼稚 B 細(xì)胞產(chǎn)生 IgM 和 IgD。在 B 細(xì)胞成熟過程中，通過同種型轉(zhuǎn)換，成熟的 B 細(xì)胞將產(chǎn)生 IgG、IgA 或 IgE 同種型和亞類中的一種。不同的同種型在體內(nèi)具有不同的半衰期，從 12 小時到 8 天不等 。
小鼠同種型基因
每條重鏈由可變區(qū)和恒定區(qū)組成。恒定區(qū)被指定為不同的基因，盡管它們僅構(gòu)成免疫球蛋白重鏈的一部分。
對于 IgG2a 和 IgG2c 同種型：具有 Igh1-b 等位基因的近交小鼠品系具有 IgG2c 同種型，而不是 IgG2a 。除其他同種型外，鼠類重鏈基因座僅具有這兩種同種型基因中的一種。小鼠 IgG2a 支架有時用于重組抗體表達(dá)。
表 1 列出了小鼠抗體類別、子類、基因名稱以及 NCBI 和 IMGT 基因數(shù)據(jù)庫的鏈接。
表 2 列出了實(shí)驗(yàn)室中一些常用動物物種的不同同種型和亞類基因組。IgG2a 在某些小鼠品系中不存在，例如 C57BL、SJL 和 NOD 小鼠，它們具有 IgG2c。
小鼠抗體分子量
IgA、IgD 和 IgG 的重鏈具有一個具有三個免疫球蛋白 (Ig) 結(jié)構(gòu)域的恒定區(qū)。例如小鼠IgA重鏈恒定區(qū)有344個氨基酸，小鼠IgG1恒定區(qū)有324個氨基酸。其他類型的重鏈可能具有不同數(shù)量的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。例如，分泌型和膜結(jié)合型 IgD 重鏈恒定區(qū)有兩個 Ig 結(jié)構(gòu)域。IgE 和 IgM 的重鏈有一個帶有四個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的恒定區(qū)。小鼠 IgM 重鏈恒定區(qū)有 475 個氨基酸。來自所有同種型的重鏈都有一個帶有單個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的可變區(qū)。
每個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域長約 110 個氨基酸。每條IgD和IgG重鏈約450個氨基酸，每條IgE和IgM重鏈約550個氨基酸。每條輕鏈（kappa 或 lambda）都有一個恒定的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域和一個可變的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，大約有 211 到 217 個氨基酸。常見的 IgG 同種型的分子量為 150 KD。在還原條件下，每條重鏈約為50 KD，每條輕鏈約為25 KD。IgM 往往以五聚體或六聚體形式存在，其中 IgM 分子通過二硫鍵共價連接，從而產(chǎn)生 970 KD 的分子量。由于免疫球蛋白是糖基化的，因此表觀分子量可能與標(biāo)稱分子量不同，有時甚至區(qū)別較大。
小鼠抗體生產(chǎn)
小鼠是單克隆抗體產(chǎn)生的主要動物宿主，也是多克隆抗體產(chǎn)生的宿主。小鼠單克隆抗體生產(chǎn)也會涉及到實(shí)驗(yàn)室儀器、實(shí)驗(yàn)耗材及一些科研試劑。比如：用外源抗原以及常用的弗氏佐劑或新型水溶性 QuickAntibody對小鼠（通常是BALB/c小鼠， 進(jìn)行免疫。小鼠單克隆抗體也可以通過將來自特定小鼠品系的未免疫脾細(xì)胞與自身抗體融合直接獲得，如抗 SM Y12 抗體的情況。其他菌株，如 C57BL/6 、NMRI、C3H 和 SJL，以及其他佐劑如殼聚糖、LQ 或不完全弗氏佐劑，以及過表達(dá)免疫原的埃文細(xì)胞，也可以使用�；蚬こ绦∈笃废狄部梢宰鳛樗拗鏖_發(fā)特異性抗體，例如通過β3Gn-T5基因敲除小鼠開發(fā)了一種對GM3神經(jīng)節(jié)苷脂具有高結(jié)合特異性的IgG單克隆抗體。
截至2022年6月5日，科研數(shù)據(jù)庫列出了針對12039個人類基因、7144個小鼠基因、6475個大鼠基因以及來自其他156個物種的11079個基因的254742個小鼠單克隆抗體。
大多數(shù)單克隆抗體是在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的。通常使用抗小鼠二抗。 二抗多數(shù)為山羊抗小鼠。
蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司提供的實(shí)驗(yàn)室儀器，實(shí)驗(yàn)耗材，生化試劑等廣泛用于抗體紙杯、抗體生產(chǎn)等工藝。
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