多領域百花齊放！
隨著IsoPlexis的產品獲得越來越多科研工作者的認可，使用IsoPlexis功能蛋白質組學技術發(fā)表的文獻數(shù)量也呈現(xiàn)明顯上升趨勢，包括Nature、Cell、Immunology、Gastroentrology等頂級期刊。接下來，讓小編帶大家回顧一下10月使用IsoPlexis功能蛋白質組學技術的文獻精選，涵蓋了細胞治療、器官移植多個領域。
01
文獻一
單細胞分析揭示了針對實體瘤的細胞治療產品多功能性的增加
發(fā)表期刊：
《Cancer Immunology Research》
影響因子12.02
隨著新的CAR-T細胞的研發(fā)，研究人員必須對這些細胞的功能進行定性和評估，以更好地了解它們的工作原理。細胞產品是異質的，在單細胞水平上評估生物功能是至關重要的，因為群組水品的分析是平均的群體特征，可能會錯過單個細胞中的關鍵功能指標。IsoPlexis的單細胞分泌組解決方案為研究人員提供了一個進行單細胞細胞因子分析的自動化平臺，使他們能夠輕松地對細胞進行功能表型，并對效力和持久性的關鍵生物標志物進行表征。
最近發(fā)表在《Cancer immunology research》上的一篇論文描述了為克服腫瘤微環(huán)境(TME)免疫抑制而設計的CAR-T細胞的特征。研究人員試圖通過靶向Fas信號來防止TME中的T細胞功效喪失。通常情況下，作為對免疫激活的負反饋循環(huán)的一部分，F(xiàn)as信號作用于調節(jié)T細胞的擴增和削弱免疫功能。實體瘤細胞可以通過表達Fas配體（FasL）與T細胞上的Fas受體結合并誘導細胞凋亡，或細胞死亡。FasL的表達已在各種實體瘤中被檢測到，并被證明與疾病的進展、疾病嚴重程度和糟糕的治療結果有關。
為了保護效應T細胞免受Fas信號通路的激活，研究人員設計了CAR-T細胞，當T細胞與特定抗原接觸時，可以分泌Fas誘餌分子，從而防止Fas與FasL的相互作用。為了針對實體瘤，CAR-T細胞被設計為靶向一種由多種實體瘤表達的抗原——前列腺干細胞抗原（PSCA）。研究人員證實，PSCA刺激導致CAR-T細胞分泌Fas誘餌分子，這種分泌使CAR-T細胞免受Fas信號啟動的影響。
接下來，研究人員想了解這種修飾如何影響細胞功能。利用IsoPlexis的單細胞分泌組平臺，他們評估了細胞的多功能性，即細胞分泌兩種或多種細胞因子的能力。用表達FasL的胰腺癌細胞刺激被修飾為分泌Fas誘餌（CAR.FD）的CAR-T細胞。與對照組的CAR-T細胞相比，CAR.FD細胞有更高比例的多功能細胞，一些細胞表達多達7種不同的細胞因子，而對照組細胞最多只表達4種細胞因子。
因為細胞的多功能性與改善細胞治療產品效力、療效和臨床結果有關，在CAR.FD細胞中觀察到的多功能性的增加是一個重要的效能指標，可以指導進一步的研究。隨后的體外和體內實驗顯示，與對照組CAR-T細胞相比，表達Fas誘餌的CAR-T細胞能更有效地控制腫瘤生長。
02
文獻二
單細胞功能分析外周血T細胞活性揭示器官
排斥的機制
發(fā)表期刊：
《Journal of the American Society of Nephrology》
影響因子：14.98
器官移植可以提高和延長受者的壽命，移植的過程常會伴隨移植排斥；提高對移植組織和免疫系統(tǒng)之間的相互作用的認識，可以改善結果，降低排斥率。由于高達40%的腎臟移植在移植后10年內失敗，研究人員正在尋找方法來審視排斥反應的機制，并改善腎臟移植者的移植后護理。鑒于免疫細胞及其功能的多樣性，免疫反應是復雜的，細胞研究中的很多分析技術表征的是平均水平的信號，如細胞因子分泌水平或蛋白質表達水平的群組檢測，這些結果將錯過由于細胞異質性造成的關鍵的功能差異。單細胞分析讓研究人員更好地了解每個細胞如何對免疫反應做出貢獻，從而更深入地了解免疫功能。通過測量每個細胞的多達32種功能蛋白，IsoPlexis的單細胞分泌組平臺提供了對免疫細胞進行功能表型的能力，并審視免疫反應的分子機制。
在最近發(fā)表于《Journal of the American Society of Nephrology》的一篇論文中，研究人員試圖確定可能導致腎臟移植體液排斥的免疫因素。被稱為終末分化效應記憶細胞或TEMRA細胞的CD8+記憶T細胞亞群，先前已被證明在其他類型的免疫相關疾病中具有致病性，包括狼瘡、硬皮病和腎臟移植失敗。研究人員使用了多種技術來研究CD8+記憶T細胞如何促進體液排斥。
為了描述CD8+T細胞的功能，研究人員使用IsoPlexis的單細胞分泌組平臺，測量從有體液排斥和無體液排斥的腎移植受者血液中分離出來的細胞的分泌功能蛋白。與正�；顧z的受者相比，有體液排斥的受者的CD8+T細胞在CD3/CD28刺激后有明顯表現(xiàn)出更強多功能性，即更多細胞能夠分泌2種或更多細胞因子。多功能細胞此前已被確定為免疫反應的驅動因素，表明了排斥的一個可能機制。
作者進一步分析了受刺激的CD8+T細胞的細胞因子分泌物，發(fā)現(xiàn)有體液排斥反應的受者的促炎癥（IFN-γ、TNF-α、MIP-1α和MIP-1β）和細胞毒性（顆粒酶B和穿孔素）細胞因子增加。這些細胞因子亞群的綜合增加使研究人員相信，TEMRA CD8+ T細胞對免疫反應有貢獻，這可能表明TEMRA CD8+ T細胞失調可能導致體液排斥。
其他實驗顯示，與其他T細胞亞群相比，來自體液排斥樣本的TEMRA CD8+ T細胞具有更強的細胞毒性和遷移活性，這使研究人員得出結論，TEMRA CD8+ T細胞在體液排斥中發(fā)揮著積極作用。這些發(fā)現(xiàn)具有治療意義，有助于降低腎臟移植受者的排斥率。
利用單細胞分析來確定免疫反應的驅動因素的意義表征移植中單個免疫細胞的功能，有助于改善臨床結果，降低排斥反應率，并改善移植后的治療。通過使用單細胞功能分析來確定關鍵的功能指標，包括細胞多功能性和多功能指數(shù)PSI，研究人員可以更好地了解單個免疫細胞如何協(xié)調免疫反應的工作。這項研究證明了細胞多功能性如何被用作外周T細胞功能的潛在非侵入性評估，顯著分離出有和沒有排斥反應的腎移植受者。IsoPlexis的單細胞功能表型為研究人員提供了一個強大的工具，以調查單個免疫細胞的功能，并揭示關鍵的功能驅動因素，提供獨特的、可操作的見解，以推動新發(fā)現(xiàn)和改進療法的開發(fā)。
參考文獻：
1. Bajgain P, et al. Secreted Fas decoys enhance the antitumor activity of engineered and bystander T cells in Fas ligand–expressing solid tumors. Cancer Immunol Res. 2022.
2. Ngoc TD, et al. Effector Memory–Expressing CD45RA (TEMRA) CD8+ T Cells from Kidney Transplant Recipients Exhibit Enhanced Purinergic P2X4 Receptor–Dependent Proinflammatory and Migratory Responses. J Am Soc Nephrol. 2022.
3. Amit M, et al. Distinct immune signature predicts progression of vestibular schwannoma and unveils a possible viral etiology. J Exp Clin Cancer Res. 2022.
