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紫外可見光譜理論及分光光度計的常見應用問題

瀏覽次數:648 發(fā)布日期:2022-11-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
紫外-可見光譜或紫外可見分光光度法(UV-Vis或UV/Vis)是指紫外-可見光譜區(qū)域的吸收光譜或反射光譜。紫外-可見 (UV-VIS) 光譜法是一種分析方法,可以根據分析物接收到的光量來測量分析物的量。

紫外可見分光光度計
紫外/可見區(qū)域 (UV-VIS) 測量的波長范圍從大約 200 nm 到 800 nm。紫外線或可見光輻射分子的吸收導致分子的電能水平之間的轉變。不同材料的光學和電子特性,例如薄膜、粉末、整體固體和液體,都適用于表征。

紫外可見光譜是一種經濟、高效、簡單、通用、無損的分析技術,適用于大范圍的有機化合物和一些無機物種。作為波長的函數,紫外可見分光光度計測量通過介質的光的吸收或透射。
為了對液流中物質的濃度進行分類和測量,高效液相色譜和超高效液相色譜中都結合了紫外可見檢測器。

紫外可見光譜理論
進行紫外可見光分析時,當入射輻射和發(fā)色團中的電子云之間的相互作用會導致電子躍遷涉及促進一個或多個外殼或鍵合電子從基態(tài)進入更高能態(tài)時,紫外-可見 (UV-Vis) ) 光譜是推導出來的。通常,物質的紫外和可見光譜帶較大。并且可能不會表現出高度的復合識別精度。盡管如此,它們對于定量分析來說是足夠的,并且可用作檢測多種物質的替代手段。

紫外可見分光光度計的應用
在理化實驗室中,紫外可見光譜比較常用。比如:在 QA、QC、檢驗所、分析研究院等實驗室中對分析物進行定量分析的常用技術是紫外可見分光光度法。紫外可見分光光度法的基本原理基于比爾定律。

紫外可見分光光度計常見問題
1.為什么紫外光譜用于藥物分析?

由于紫外分光光度計測量紫外光的可見區(qū)域,可以提供有價值的信息,并檢測藥物化合物中活性成分水平的任何雜質。
2.分光光度法的應用有哪些?
分光光度法在天文學、分子生物學、化學和生物化學、物理學等多種不同的領域均有應用。在分子生物學中分光光度計的主要應用包括測量蛋白質、DNA 或 RNA、細菌細胞形成和酶反應等物質的濃度。
3.紫外光譜的范圍是多少?
UV-Vis 是一種通用程序,因為在 UV-可見波長光譜中,大多數分子吸收光。紫外頻率在 100 到 400 nm 之間,可見光譜在 400 到 700 nm 之間。
4.紫外光譜中使用哪種燈?
使用光譜儀將波長范圍在 190 nm 和 800 nm 之間的光通過比色皿輻射,并記錄吸收光譜。可以使用不同的寬帶 UV-Vis 光源,所以,在光譜儀中通常使用僅發(fā)射單線光譜的汞燈。
5.什么是IR原理?
紅外光譜的原理利用分子似乎吸收獨特的光頻率的想法,這是分子相應結構的典型特征。能量取決于分子表面的形式、與之相關的振動耦合以及對應于原子的質量。
6.什么是紫外可見光譜,它是如何工作的?
UV-Vis 是一種快速、方便且廉價的測定分析物溶液濃度的方法。在 UV-Vis 中,光束穿過比色皿中的溶液,波長范圍在 180 到 1100 nm 之間。樣品在比色皿中吸收這種紫外線或可見光輻射。
常見的比較好用的紫外分光光度計有哪些?

常見的紫外分光光度計進口的主要是nanodrop one分光光度計,它只需 1-2µL 樣品即可獲得準確的 DNA、RNA 和蛋白質定量分析結果。
國產的紫外分光光度計,比如nano-200,nano-300,nano-300等。

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