隨著實驗室細胞培養(yǎng)的發(fā)展，除了原代培養(yǎng)之外，還將建立開發(fā)或獲得眾多的細胞系。每一個細胞系均擴大了其起源細胞的應(yīng)用，成為有價值的資源。若該細胞系頗為獨特，則其可能是不可替換的；替換至少也是昂貴與耗時的。因此，必須通過保存細胞系來保證這種重要投資。

由于培養(yǎng)早期傳代培養(yǎng)的選擇，有限細胞系的衰老以及連續(xù)細胞系的遺傳和表現(xiàn)不穩(wěn)定性，使細胞系在連續(xù)培養(yǎng)時有變異傾向。

此外，即使在管理最好的實驗室中也有可能發(fā)生儀器故障和污染。交叉污染以及錯誤辨識的發(fā)生率也很高。因此，存在諸多理由進行冷凍儲存細胞，總體概述有10大不得不凍存細胞的理由：

①由于遺傳不穩(wěn)定性而導(dǎo)致基因漂移；
②衰老，最后導(dǎo)致細胞系消失；
③生長特性的轉(zhuǎn)化以及惡性相關(guān)特性的獲得；
④由于選擇和去分化導(dǎo)致表型的不穩(wěn)定性；
⑤微生物污染；
⑥其他細胞系的交叉污染；
⑦由于操作粗心而導(dǎo)致的錯誤鑒別；
⑧孵育箱故障；
⑨對于保存那些不立即使用的細胞系，可節(jié)省時間和材料；
⑩需要將細胞系轉(zhuǎn)給其他使用者。

在考慮凍存細胞之前，需滿足以下特定條件：

01
確認凍存前需證實細胞系未受污染，且確為該細胞系。盡管對于新獲得的細胞系，可以在完全確認前凍存幾支，但在大量凍存前應(yīng)進行徹底確認。

02
凍存時間，如果是有限細胞系，這些細胞應(yīng)經(jīng)5代倍增生長，獲得足夠量的細胞再進行凍存。連續(xù)細胞系應(yīng)將其克隆化，選擇特征性的克隆，待生長至足夠數(shù)量再進行凍存。連續(xù)細胞系有其優(yōu)勢：它們可無限生長，生長比較迅速，容易克隆，但是它們?nèi)狈�遺傳穩(wěn)定性。有限細胞系通�；蚪咏�二倍體。在一定傳代水平間是穩(wěn)定的，但是，它們很難克隆，生長緩慢，最終死亡或發(fā)生轉(zhuǎn)化。

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