多通道毛細管電泳儀系統(tǒng)在蛋白藥物純度及電荷異質性表征中的應用
蛋白藥物是一類重要的高效治療藥物，單克隆抗體已成功用于多種疾病的治療。新型的蛋白藥物如雙抗，融合蛋白，ADC藥物等也越來越多的出現(xiàn)在各種醫(yī)學領域。蛋白藥物的純度和電荷異質性表征在藥物生產的研發(fā)和質控等階段都是至關重要的。然而，隨著生物制藥企業(yè)在其開發(fā)管線中的候選藥物的越來越多，分子復雜性增加，對分析通量的要求越來越高。
BioPhase™ 8800系統(tǒng)是SCIEX推出的新一代多通道毛細管電泳儀(圖1)，它的卡盒由 8 根毛細管組成，其并行采集和處理數據的能力，將分析時間由原來的幾周甚至幾個月縮短到幾天。利用BioPhase™ 8800系統(tǒng)，分析科學家可以在有限的時間內同時進行大量樣本的表征研究，包括穩(wěn)定性，降解研究，優(yōu)化存儲條件或其他關鍵質量屬性，極大地提高了分析的效率。
圖 1. BioPhase™ 8800系統(tǒng)
主要特點
- 多通道毛細管卡盒 (圖2)，可同時運行多達8個樣品，實現(xiàn)平行樣品分析；
- 集成光學模塊通過軟件控制自動切換，可以在單個序列中同時使用UV和LIF檢測；
- 使用符合ANSI標準的96孔板進行樣品和試劑制備，允許自動制備樣品和試劑；
- 基于循環(huán)液體的卡盒溫控系統(tǒng)，嚴格控制分離溫度。
圖 2. BioPhase™ 8800系統(tǒng)8通道毛細管卡盒
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圖3. 同一樣品 (IgG control standard) 在 8 個通道上的CE-SDS結果
與SCIEX PA 800 Plus系統(tǒng)相比，SCIEX BioPhase™ 8800系統(tǒng)具有以下特點：
1. 通量高，分析速度快。PA 800 Plus系統(tǒng)運行16針樣品的時間，用 BioPhase™ 8800系統(tǒng)可運行128針；
2. 與 PA 800 Plus系統(tǒng)結果一致，可以很方便的將 PA 800 Plus系統(tǒng)的方法轉移到 BioPhase™ 8800系統(tǒng)上實現(xiàn)。
3. 重復性好，8個通道連續(xù)運行16針，在 BioPhase™ 8800系統(tǒng)上128個數據遷移時間RSD值為 1.10%。
二． 高通量多毛細管電泳進行蛋白CIEF電荷異質性表征
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十二烷基硫酸鈉毛細管凝膠電泳 (CE-SDS) 是蛋白質藥物快速表征、釋放和穩(wěn)定性測試最常用的技術之一。SCIEX BioPhase™ 8800系統(tǒng)采用了多毛細管設計，能夠同時進行多個樣本的純度表征。
圖4. 同一樣品( NIST 單抗)在 8 通道中的CIEF結果
BioPhase™ 8800系統(tǒng)進行CIEF實驗具有以下特點：
1.多重批量數據采集和處理能力，以支持蛋白的高通量電荷異質性篩選；
2.改進的算法可以基于pI進行數據分析和峰值報告，減少數據處理時間和人為干預；
3.多通道毛細管并行采集樣品，縮短開發(fā)和分析時間，96孔板樣品分析的時間從單通道的5天縮短為12小時；
4.結果與單通道PA 800 Plus系統(tǒng)的等電聚焦參數具有良好的相關性，可以很容易將方法從單毛細管系統(tǒng)向多毛細管系統(tǒng)的轉移。
