Rapamycin
靶點(diǎn): mTOR
Rapamycin(Sirolimus) 是一種特異性的 mTOR 抑制劑，IC50 為 0.1 nM。
體外實(shí)驗(yàn)
雷帕霉素在 HEK293 細(xì)胞內(nèi)抑制內(nèi)源性 mTOR 活性的 IC50 值為 0.1 nM,更分別有效地抑制 iRap （IC50=5 nM）和 AP 21967 （IC50=10 nM）[1]。雷帕霉素通過誘導(dǎo)自噬對惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用，提示在惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，阻斷 PI3K/Akt 信號通路可顯著提高 mTOR 抑制劑的療效。雷帕霉素以劑量依賴性的方式抑制三種細(xì)胞系的細(xì)胞活力，但其敏感性各不相同。對于 T98G、U87-MG U373-MG 三種細(xì)胞的 IC50 值分別為 2 nM，1 μM，和 > 25 μM[3]。
體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
在小鼠中使用雷帕霉素（i.p, 1.5 mg/kg）治療的 7 天和 14 天時(shí)[4]，幾乎完全阻止了足底肌肉重量和纖維大小的肥厚性增加。每日以雷帕霉素( 2 mg/kg i.p.) 治療 WT 或 LS/+小鼠 4 周，隨后每周注射相同劑量的雷帕霉素 4 周。雷帕霉素處理的 LS/+小鼠心臟異常胎兒基因表達(dá)譜顯著逆轉(zhuǎn)合物[5]。
[1]. Edwards SR, et al. The rapamycin-binding domain of theprotein kinase mammalian target of rapamycin is a destabilizing domain. J BiolChem, 2007, 282(18), 13395-13401.
[2]. Lalic H, et al. Rapamycin enhances dimethylsulfoxide-mediated growth arrest in human myelogenous leukemia cells. LeukLymphoma. 2012 Nov;53(11):2253-61.
[3]. Takeuchi H, et al. Synergistic augmentation ofrapamycin-induced autophagy in malignant glioma cells by phosphatidylinositol3-kinase/protein kinase B inhibitors. Cancer Res, 2005, 65(8), 3336-3346.
[4]. Bodine SC, et al. Akt/mTOR pathway is a crucial regulatorof skeletal muscle hypertrophy and can prevent muscle atrophy in vivo. Nat CellBiol, 2001, 3(11), 1014-1019.
[5]. Marin TM, et al. Rapamycin reverses hypertrophiccardiomyopathy in a mouse model of LEOPARD syndrome-associatedPTPN11 mutation.J Clin Invest. 2011 Mar;121(3):1026-43.
3-Methyladenine
靶點(diǎn): Autophagy
3-Methyladenine 是 PI3K 的抑制劑。它通過抑制 class III PI3K 廣泛作為自噬 (autophagy) 的抑制劑使用。
體外實(shí)驗(yàn)
3-甲基嘌呤有輕微的偏好與 Vps34 在體外結(jié)合，Vps34（IC50 = 25 µM），PtdIns3Kγ（IC50= 60 µM），和 3-甲基嘌呤( 10 mM)可以抑制所有 PtdIns3Ks [1]。 3-甲基嘌呤 (3-MA，5 mM) 在無糖和正常條件下均能抑制 HeLa 細(xì)胞的自噬。3-甲基嘌呤 (2.5、5 或 10 mM)誘導(dǎo) HeLa 細(xì)胞的 caspase 依賴性細(xì)胞死亡，且死亡的發(fā)生與自噬抑制無關(guān)。此外，3-甲基嘌呤(3-MA，1 mM)顯著縮短了諾考達(dá)唑誘導(dǎo)的前后期阻滯的時(shí)間[2]。
體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
3-甲基嘌呤 (1.5 mg/100 g， i.p.)治療 12 和 24 小時(shí)，均可減輕牛膽酸鈉誘導(dǎo)的大鼠急性重癥胰腺炎(SAP)。3-甲基嘌呤抑制�；悄懰徕c誘導(dǎo)的胰腺腺泡細(xì)胞自噬。3-甲基嘌呤還顯著抑制牛膽酸鈉誘導(dǎo)的大鼠急性重癥胰腺炎中的 PI3K / Akt 和 NF-κB 信號通路[3]。
[1]. Miller S, et al. Finding afitting shoe for Cinderella: searching for an autophagy inhibitor. Autophagy.2010 Aug;6(6):805-807.
[2]. Hou H, et al. Inhibitors ofphosphatidylinositol 3'-kinases promote mitotic cell death in HeLa cells. PLoSOne. 2012;7(4):e35665.
[3]. Wang X, et al. Acanthopanaxversus 3-Methyladenine Ameliorates Sodium Taurocholate-Induced Severe AcutePancreatitis by Inhibiting the Autophagic Pathway in Rats. Mediators Inflamm.2016;2016:8369704.
[4]. Meng Li, et al. Alda-1Ameliorates Liver Ischemia-Reperfusion Injury by Activating AldehydeDehydrogenase 2 and Enhancing Autophagy in Mice. J Immunol Res. 7 August 2018.
MK 2206 (dihydrochloride)
靶點(diǎn): Akt
MK 2206 是一種口服有效的 Akt 變構(gòu)抑制劑，抑制 Akt1/Akt2/Akt3 的 IC50 分別為 5 nM/12 nM/65 nM。
體外實(shí)驗(yàn)
使用 MK 2206 處理 CNE-1、CNE-2、 HONE-1 和 SUNE-1 (0-10 μM) 鼻咽喉癌細(xì)胞系 72 和 96 小時(shí)后，發(fā)現(xiàn)該抑制劑呈劑量、時(shí)間依賴性的抑制細(xì)胞活力。在 72 和 96 小時(shí)，MK 2206 對 CNE-1、CNE-2 和 HONE-1 的 IC50 范圍為 3-5 μM。在 SUNE-1 細(xì)胞系內(nèi) IC50 范圍小于 1 μM [1]。MK 2206 可有效力地抑制 Ras 野生型(WT)細(xì)胞系(A431, HCC827, NCI-H292)的細(xì)胞生長; IC50 值分別為 5.5、4.3 和 5.2 μM。相比之下, MK-2206 對 Ras-mutant 細(xì)胞系(NCI-H358、NCI-H23、NCI-H1299、 Calu-6） 的 IC50 值分別為 13.5、 14.1、 27.0 和 28.6 μM。 除了含有 PIK3CA E545K 突變的 NCI-H460 細(xì)胞系(IC50 = 3.4 μM) [2]。
體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
MK 2206 劑量( 480 mg/kg / 1周，240 mg/kg 3次/周)可抑制異種人 CNE-2 基因移植裸鼠的生長。兩組 MK 2206 腫瘤重量均明顯輕于對照組(P<0.01)。在接受MK 2206 治療后，觀察體重暫時(shí)減輕[1]。
[1]. Zhao YY, et al. Effects of an oral allosteric AKT inhibitor (MK-2206) on human nasopharyngeal cancer in vitro and in vivo. Drug Des Devel Ther. 2014 Oct 10;8:1827-37.
[2]. Hirai H, et al. MK-2206, an allosteric Akt inhibitor, enhances antitumor efficacy by standard chemotherapeutic agents or molecular targeted drugs in vitro and in vivo. Mol Cancer Therapy, 2010, 9(7), 1956-1967.
[3]. Jain A, et al. Abl kinase regulation by BRAF/ERK and cooperation with Akt in melanoma. Oncogene. 2017 Aug 10;36(32):4585-4596.
[4]. Dhar D, et al. Liver Cancer Initiation Requires p53 Inhibition by CD44-Enhanced Growth Factor Signaling. Cancer Cell. 2018 Jun 11;33(6):1061-1077.e6.
