研究人員分析了被 AKT19 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的抗凋亡蛋白 BCL-2 家族成員，MCL-1。低 NF-kB 活性依賴 BCR 的 DLBCL 細(xì)胞系(DHL4, DHL6, LY1, LY7)在 SYK 或 PI3K α/β 抑制后，MCL-1 表達(dá)顯著下調(diào)(如Figure1. 所示)。另外一個(gè)具有增加 PI3K/AKT 活性的遺傳基礎(chǔ)的系(Karpas422)在 PI3K 阻斷后，也降低了 MCL-1 水平。

Figure1. BCR 信號(hào)抑制劑對(duì)促凋亡和抗凋亡 BCL2 家族成員的表達(dá)有不同的調(diào)節(jié)作用

      基于已經(jīng) BCR 信號(hào)抑制劑對(duì)于凋亡的影響，研究人員繼續(xù)深入探討，利用回歸正交試驗(yàn)的方式，發(fā)現(xiàn) Copanlisib 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡依賴于 BCL-xL和 MCL-1介導(dǎo)的線粒體應(yīng)答進(jìn)程。隨后，研究人員分析了在 BCR 依賴型 DLBCL 細(xì)胞中（低濃度的 NF-kb），MCL-1 所發(fā)揮的抗凋亡相關(guān)作用。通過藥理學(xué)抑制或基因敲除 MCL-1 與 Venetoclax 協(xié)同作用于 DHL4 和 DHL6 兩種細(xì)胞。研究結(jié)果表明， 在 BCR 依賴型 DLBCL 細(xì)胞中，BCL-2 的異構(gòu)會(huì)增強(qiáng) PI3K α/β 的結(jié)合和 BCL-2 阻滯敏感性（如 Figure2.所示）。

Figure 2.Copanlisib 使 DLBCL 細(xì)胞 對(duì) Venetoclax 敏感

      研究人員，將 Copanlisib 和 Venetoclax 聯(lián)合作用于 DLBCL 細(xì)胞模型中，研究它們的作用效果。在具有共同的基因背景（BCL-2 調(diào)節(jié)異常）的 DLBCL 細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)，Copanlisib 和 Venetoclax 在 DHL4，DHL-6,LY1,HBL1 和 TMD 8 中均發(fā)揮協(xié)同作用。這些體外結(jié)果表明，Copanlisib 和 Venetoclax 在 BCR 依賴型的 DLBL 細(xì)胞中，可發(fā)揮協(xié)同作用（如 Figure3.所示）。

 Figure 3. 在 DLBCL 細(xì)胞模型中，Copanlisib 與 Venetoclax 聯(lián)合使用具有協(xié)同作用

       在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)了 Copanlisib 和 Venetoclax 的協(xié)同作用后，研究人員轉(zhuǎn)向該種聯(lián)合用藥在體內(nèi)異種移植裸鼠中的作用。體外實(shí)驗(yàn)分為載體空白組，Copanlisib 組； Venetoclax 組；聯(lián)合用藥組。單獨(dú)使用 Copanlisib實(shí)驗(yàn)組，在第1,2,8,9,15,16 天，以 12 mg/kg 的劑量尾靜脈注射處理小鼠。單獨(dú)使用Venetoclax 實(shí)驗(yàn)組，連續(xù)給藥 21 天，以 100 mg/kg 的口服灌胃處理小鼠。所有的實(shí)驗(yàn)處理在 21 天結(jié)束。如圖4所示，單獨(dú)使用 Copanlisib 時(shí)并不能延緩腫瘤的生長(zhǎng)或有治療性的改善。但值得注意的是，聯(lián)合使用 Copanlisib 和 Venetoclax 可以顯著地延緩腫瘤的增殖（P<0.0001）。在本次實(shí)驗(yàn)的最后（第 139天時(shí)），在聯(lián)合使用 Copanlisib和 Venetoclax 的裸鼠中，僅有 25% 的裸鼠死亡，75% 的裸鼠呈一種無腫瘤的狀態(tài)。

Figure 4. 在 DLBCL 異種移植腫瘤模型中，Copanlisib 與 Venetoclax 聯(lián)合使用具有協(xié)同作用

參考文獻(xiàn)

Bojarczuk K, et al. Targeted inhibition of PI3Kα/δ is synergistic with BCL-2 blockade in genetically defined subtypes of DLBCL.Blood. 2019 Jan 3;133(1):70-80.
 

小M 的小思考：

   隨著精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)時(shí)代的來臨， 靶向治療和聯(lián)合治療可以為越來越多的患者提供個(gè)性化的診療服務(wù)。 根據(jù)《Blood》的研究報(bào)道，Copanlisib 和 Venetoclax 的協(xié)同作用有望成為 DLBCL 治療的新方式。

相關(guān)產(chǎn)品：

Alpelisib

Alpelisib (BYL-719) 是有效，選擇性的 PI3Kα 抑制劑， IC₅₀ 為 5 nM。

Copanlisib (BAY80-6946) 是一種 ATP競(jìng)爭(zhēng)，選擇性 I 型 PI3 激酶抑制劑，作用于 PI3Kα，PI3Kδ，PI3Kβ 和 PI3Kγ 的  IC_{50 值} 分別為 0.5，0.7，3.7 和 6.4 nM。

Venetoclax (GDC-0199;ABT-199) 是一種高效，有選擇性和口服活性的 Bcl-2 抑制劑，K_i 小于 0.01 nM。