細(xì)胞培養(yǎng)在各位研究生的日常實(shí)驗(yàn)中占據(jù)了相當(dāng)多的時(shí)間，你的細(xì)胞如果有幸養(yǎng)的很好，真是你好我好大家好，實(shí)驗(yàn)事半功倍；細(xì)胞培養(yǎng)差的學(xué)生，說(shuō)多了都是淚，自掛東南枝了，一把鼻涕一把淚。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用的技術(shù)，通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞，又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖等，那下面進(jìn)入正題，分享一下細(xì)胞培養(yǎng)的秘籍。

以動(dòng)物細(xì)胞為例，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要的一些特殊條件。
 

① 加胎牛血清培養(yǎng)基：

動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)常常需要血清。各種細(xì)胞合成培養(yǎng)基（如MEM、RPMll640、DMEM）只提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，包括碳水化合物、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等。血清提供生長(zhǎng)必需因子，如激素、微量元素、礦物質(zhì)和脂肪。根據(jù)不同細(xì)胞的需求，一般含有10%～20%的血清培養(yǎng)基即可維持細(xì)胞較快的生長(zhǎng)增殖速度。

② 無(wú)菌環(huán)境：

無(wú)毒和無(wú)菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件。使用的各種試劑和耗材要經(jīng)過(guò)高壓或紫外線滅菌。嚴(yán)格的無(wú)菌操作是養(yǎng)好細(xì)胞的必要前提。為防止細(xì)胞受到微生物感染，可在培養(yǎng)基中加入雙抗。

③ 溫度和氣體環(huán)境：

一般動(dòng)物細(xì)胞在體外培養(yǎng)的適宜溫度是37℃，不適宜的環(huán)境溫度會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)甚至死亡。二氧化碳和氧氣的比例要在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中不斷進(jìn)行調(diào)節(jié)，一般維持在5%。二氧化碳既是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，又與維持培養(yǎng)液的pH密切相關(guān)。

如何防控污染：保持良好的操作習(xí)慣，超凈臺(tái)要紫外滅菌30min，以70%的乙醇擦拭無(wú)菌操作臺(tái)，開(kāi)啟超凈臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。
 

每次只處理一種細(xì)胞，以免失誤混淆或細(xì)胞間污染，操作不要觸碰吸管尖頭部或容器口等。

像對(duì)待孩子一樣養(yǎng)細(xì)胞，它很脆弱，最好每天關(guān)注一下，以免出現(xiàn)培養(yǎng)箱缺二氧化碳，停電、溫度不夠等現(xiàn)象。

避免全軍覆沒(méi)，好細(xì)胞要及時(shí)保存，有備用的細(xì)胞，這樣即使有細(xì)胞污染還可以有備用的細(xì)胞頂上，不至于太惱火，好習(xí)慣要保持。

不同細(xì)胞喜好不同，需要在培養(yǎng)中慢慢體會(huì)，例如平滑肌細(xì)胞比較好長(zhǎng)，2-3天可能就會(huì)有很多細(xì)胞，應(yīng)該算是比較好養(yǎng)活的；內(nèi)皮細(xì)胞分泌物較多，需要時(shí)不時(shí)換洗才會(huì)長(zhǎng)的好等等。

培養(yǎng)好的細(xì)胞會(huì)被安排不同的實(shí)驗(yàn)，有的看趨勢(shì)、有的看狀態(tài)、有的看蛋白表達(dá)，有的看共定位，最終它們都會(huì)和顯微鏡打交道，那我們就聊聊顯微鏡和細(xì)胞的不解之緣。

根據(jù)不同的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)需求，使用的顯微鏡也不盡相同：

Echo Rebel數(shù)字化顯微鏡，具備明場(chǎng)、相差觀察方式和正倒置一體特點(diǎn)。可以觀察培養(yǎng)瓶、孔板和培養(yǎng)皿里面的細(xì)胞形態(tài)，根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)，您可以及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)條件。同時(shí)Echo Rebel數(shù)字化顯微鏡具有自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和測(cè)量等功能，可以用來(lái)細(xì)胞計(jì)數(shù)和做細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，如果您的細(xì)胞不涉及到熒光實(shí)驗(yàn)，Echo Rebel數(shù)字化顯微鏡基本可以滿足你的需求。

▲ 成骨細(xì)胞
 

▲ 細(xì)胞計(jì)數(shù)
 

Echo Revolve Gen2熒光顯微鏡具有自動(dòng)熒光系統(tǒng)可以做到開(kāi)機(jī)即用，一鍵熒光系統(tǒng)切換，搭配的DHR和Z-Stack功能可以使細(xì)胞成像更清晰。即可以做到明場(chǎng)觀察細(xì)胞形態(tài)，同時(shí)也可以做GFP蛋白轉(zhuǎn)染的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。Echo Revolve Gen2熒光顯微鏡還可以用來(lái)檢測(cè)是否轉(zhuǎn)染進(jìn)細(xì)胞。DHR和Z-Stack的搭配可以更清楚的研究細(xì)胞內(nèi)蛋白分布表達(dá)情況等。
 

 

Echo Revolution自動(dòng)化顯微成像系統(tǒng)具備Revolve的所有功能并在此基礎(chǔ)上升級(jí)，使之專為活細(xì)胞觀察而生。HyperScan高速拼接大視野成像功能，即可以快速掃描整個(gè)樣品孔又能解決高倍鏡下視野小的問(wèn)題，可以更清晰和整體的觀察細(xì)胞形態(tài)。延時(shí)攝影成像功能（TimeLapse）結(jié)合自動(dòng)對(duì)焦與長(zhǎng)時(shí)間鎖焦，再搭配活細(xì)胞工作站和全自動(dòng)載物臺(tái)，可以實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間觀察，從而研究細(xì)胞的生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程，對(duì)研究干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成器官的整個(gè)過(guò)程具有重要意義。而孔板導(dǎo)航成像功能（Multi-well Point）可以對(duì)不同孔位進(jìn)行自定義掃描和觀察，研究不同實(shí)驗(yàn)條件對(duì)活細(xì)胞的影響。
 

培養(yǎng)細(xì)胞需要耐心及不斷的積累和摸索，了解它們，呵護(hù)它們，相信這個(gè)小小的細(xì)胞會(huì)成長(zhǎng)的很好。小編就先介紹到這里，我們的顯微鏡可以申請(qǐng)?jiān)囉门叮��?qǐng)撥打電話010-57256059聯(lián)系我們。