細胞系的抗體滴度與產(chǎn)品的產(chǎn)量與生產(chǎn)成本息息相關，實踐證明提高瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細胞系和CHO細胞系的表達滴度可以提高抗體產(chǎn)量，有效降低生產(chǎn)成本。

 

穩(wěn)定生產(chǎn)細胞系生產(chǎn)過程中，在可重復性和可放大性等多方面都具有許多優(yōu)勢。細胞的培養(yǎng)參數(shù)對細胞系的培育也具有較大的影響力。比如：溫度、pH、滲透壓、氣體流速、罐內(nèi)壓力、攪拌罐內(nèi)的攪拌槳類型、攪拌速度和細胞代謝物水平等。另外，在生物工藝技術中，細胞的密度、細胞活性、線粒體活性、LDH、NADH水平等生物因素，也會影響到蛋白質(zhì)合成、PTM等從而波及到產(chǎn)物的產(chǎn)量及品質(zhì)。

 

所以，優(yōu)化細胞系的抗體滴度，除了對宿主細胞系進行設計改造外，細胞的培養(yǎng)參數(shù)優(yōu)化設計，對于提升細胞表達滴度、滿足產(chǎn)品質(zhì)量要求也很重要。

 

我們知道，在抗體產(chǎn)品的產(chǎn)量是通過工藝放大來實現(xiàn)，而生物工藝放大過程中又會受到很多因素的影響。比如生物因素和細胞培養(yǎng)參數(shù)等，生物反應器容量體積等。所以在放大工藝生產(chǎn)中的各個環(huán)節(jié)，都需要嚴格把控，此外還需要進一步強化技術培訓指導，是工藝生產(chǎn)操作規(guī)范化、標準化，從而確保細胞的生產(chǎn)力與產(chǎn)品質(zhì)量的有效提升。

 

 

瞬時轉(zhuǎn)染細胞由于此類細胞構建生產(chǎn)細胞系比較耗時，而且難度也較大，故很少用于臨床或者商業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)，比較適用于實驗室小規(guī)模試驗。在穩(wěn)定生產(chǎn)細胞系進行規(guī)�；�工藝放大生產(chǎn)時，有時也會使用瞬時轉(zhuǎn)染細胞放大到批次或補料分批生物反應器工藝中，以快速提升產(chǎn)品產(chǎn)量加速生產(chǎn)過程。 目前，一些細胞生產(chǎn)廠商也在嘗試提高瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細胞的表達滴度。比如：這種工藝技術用于蛋白質(zhì)生產(chǎn)的轉(zhuǎn)染工藝和哺乳動物表達載體進行優(yōu)化，可使重組抗體的單位體積產(chǎn)量達到>0.5g/L。 國內(nèi)細胞生產(chǎn)商開發(fā)的CHO細胞高滴度瞬轉(zhuǎn)表達系統(tǒng)具有高產(chǎn)量低成本等優(yōu)勢，已成為生產(chǎn)抗體類藥物廣泛應用的工程細胞，而CHO細胞瞬時轉(zhuǎn)染是新藥研發(fā)過程中必不可少的技術工藝。

從長遠看來，提高瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細胞的抗體滴度 在基因治療領域也很有意義。瞬時轉(zhuǎn)染是雖是產(chǎn)生高質(zhì)量載體的常用方法，但規(guī)�；�放大生產(chǎn)仍然是基因制藥行業(yè)的一個重大挑戰(zhàn)。要想取得重大突破還需要更多的努力。在進行MDCK 細胞 、 HEK293細胞培養(yǎng), CHO懸浮細胞培養(yǎng)、貼壁細胞培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)、高抗體滴度瞬轉(zhuǎn)表達系統(tǒng)生產(chǎn)時也會面臨同樣的問題。