2021年4月13日，來(lái)自法國(guó)里昂Geneuro-Innovation的Benjamin Charvet 團(tuán)隊(duì)在Springer Nature旗下Research Square預(yù)印本平臺(tái)報(bào)道了呼吸綜合征冠狀病毒2（SARS-CoV-2） 誘導(dǎo)人淋巴細(xì)胞內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA轉(zhuǎn)錄及W型包膜蛋白表達(dá)。

ProteinSimple全自動(dòng)定量蛋白質(zhì)表達(dá)分析平臺(tái)Wes和SARS-CoV-2多重抗原血清檢測(cè)試劑盒助力健康供血者血清學(xué)研究。

研究摘要

最新研究表明，新冠肺炎患者在被呼吸綜合征冠狀病毒2（SARS-CoV-2）感染后，可能會(huì)出現(xiàn)異常的遲發(fā)性炎癥反應(yīng)和淋巴球減少癥。由于病毒感染可能激活人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒元件（HERV），本文研究了SARS-CoV-2對(duì)參與人類(lèi)疾病免疫和神經(jīng)發(fā)病機(jī)制的Herv-W和Herv-K包膜（ENV）表達(dá)的影響。

研究方法

SARS-CoV-2血清研究是將獻(xiàn)血者的血漿稀釋10倍后，使用Simple Western技術(shù)，一個(gè)基于全自動(dòng)毛細(xì)管檢測(cè)的免疫印跡平臺(tái) Wes（ProteinSimple®）搭配SARS-CoV-2多重抗原血清學(xué)檢測(cè)試劑盒（SA-001）。檢測(cè)過(guò)程依據(jù)廠商指導(dǎo)說(shuō)明。

Wes儀器搭載Compass軟件，用于儀器設(shè)置和原始數(shù)據(jù)記錄(ProteinSimple/Biotechne)。

研究結(jié)論

▪  首次暴露于SARS-CoV-2病毒可激活健康供血者外周血單核細(xì)胞（PBMC）培養(yǎng)物中早期Herv-W和Herv-K轉(zhuǎn)錄。

▪  在原代PBMC培養(yǎng)1周內(nèi)，部分供者淋巴細(xì)胞中僅檢測(cè)到Herv-W ENV蛋白表達(dá)，而PBMC未見(jiàn)SARS-CoV-2感染。

▪  HERV可被UV滅活病毒和重組刺突蛋白激活。

▪  暴露于SARS-CoV-2蛋白可誘導(dǎo)PBMC產(chǎn)生大量的IL-6，與可檢測(cè)的HERV表達(dá)無(wú)關(guān)。

綜上，SARS-CoV-2病毒蛋白可誘導(dǎo)某些個(gè)體淋巴細(xì)胞表達(dá)Herv-W ENV，這對(duì)于進(jìn)一步研究相關(guān)分子通路具有重要意義，了解患者與Herv-W激活相關(guān)的遺傳易感性及其與COVID-19相關(guān)綜合征靶向治療干預(yù)的可能相關(guān)性。

健康供血者的SARS-CoV-2血清學(xué)特征

 

如何快速精準(zhǔn)判定供血者是否曾感染過(guò)SARS-CoV-2病毒？

在對(duì)PBMC進(jìn)行分離的過(guò)程中，進(jìn)行了系統(tǒng)的血清采集。

該血清研究是采用來(lái)自ProteinSimple® SARS-CoV-2多重抗原血清學(xué)檢測(cè)試劑盒和全自動(dòng)定量蛋白質(zhì)表達(dá)分析儀器 （Wes , ProteinSimple®）完成的。

A: 5重抗原（刺突蛋白、S1亞基、S2亞基、S1受體結(jié)合域、病毒核衣殼蛋白）血清反應(yīng)性指標(biāo)Western Blot圖譜：藍(lán)色，表示陰性；紅色，表示陽(yáng)性。

B: 本研究中供血者血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果。7號(hào)至12號(hào)供血者，無(wú)血清學(xué)分析。

SARS-CoV-2多重抗原血清學(xué)檢測(cè)試劑盒特點(diǎn)

▪   一份樣品可同時(shí)檢測(cè)5重抗原血清反應(yīng)性指標(biāo)：刺突蛋白（Spike Protein）、S1亞基、S2亞基、S1受體結(jié)合域（S1 RBD）、病毒核衣殼蛋白（Nucleocapsid Protein）；

▪  可提供5重抗原的分子量信息；

▪  定量抗原反應(yīng)性，提供感染病人復(fù)雜免疫學(xué)反應(yīng)信息；

▪  血清樣品量低至1μl；

▪  高通量全自動(dòng)Western，無(wú)人為操作誤差；

▪  快速檢測(cè)，3小時(shí)出結(jié)果；

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