單細胞分離與孔板成像組合的高效細胞株開發(fā)流程
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細胞活率低？實驗效率低？新方式助力細胞株開發(fā)
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| 在生物藥物分子?(如抗體)?的生產(chǎn)過程中細胞株開發(fā)及單克隆性確認是非常關(guān)鍵的步驟。細胞株開發(fā)起于將表達目的蛋白的基因轉(zhuǎn)入宿主細胞。通過分離高效表達目的蛋白的單個活細胞即可建立細胞株。在這個過程中，單克隆性的記錄至關(guān)重要，用于確保細胞株的基因重現(xiàn)性。隨后的步驟涉及細胞克隆的產(chǎn)量、質(zhì)量和穩(wěn)定性的表征?(如下圖)。 |
| 細胞株開發(fā)的典型工作流程 |
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當前細胞株開發(fā)的工作流程有一些局限，如低細胞活率、低效的單細胞分離以及有限的單克隆性證據(jù)。有限稀釋，一種傳統(tǒng)分離單細胞的方法，依賴于統(tǒng)計概率，無法提供單克隆性的可視化證據(jù)。此外，該技術(shù)的效率非常低，最終導致每塊微孔板上可供篩選的克隆非常少。
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| CloneSelectTM高通量單細胞分離系統(tǒng)是一個新穎的臺式設(shè)備用于柔和精確地從液體樣品中分離出單個活細胞。單細胞分離系統(tǒng)采用微流控分離槽以精確地分離單個細胞，同時最小化分離不同細胞可能帶來的交叉污染的風險。當單細胞分離系統(tǒng)與?CloneSelectTMImager?(CSI)?細胞生長分析系統(tǒng)的快速成像技術(shù)配合，可以顯著提高細胞株開發(fā)流程的效率。 |
| CloneSelectTM單細胞分離系統(tǒng)的技術(shù)原理 |
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本篇應用文章我們將介紹結(jié)合單細胞接種和單克隆性驗證的工作流程。我們利用單細胞分離系統(tǒng)和CSI接種單細胞至微孔板，然后確認這些細胞的存在并記錄他們在隨后幾天里的生長過程。最后，我們將介紹如何生成包含單克隆性證據(jù)的文件用于提交監(jiān)管機構(gòu)審批。
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