在進(jìn)行生物技術(shù)藥物研發(fā)時(shí)，使用免疫原性檢測(cè)技術(shù)快速、可靠地預(yù)測(cè)生物技術(shù)藥物在體內(nèi)的免疫原性對(duì)于開發(fā)新的蛋白治療藥物如疫苗具有非常重要的意義。進(jìn)行抗病毒疫苗研發(fā)時(shí)，判斷某種疫苗是否具有免疫效果，體現(xiàn)在免疫機(jī)體后能否產(chǎn)生足夠的中和抗體。對(duì)于一些致病性和傳染性很強(qiáng)的病毒，操作活菌面臨著危險(xiǎn)性高、周期長(zhǎng)、實(shí)驗(yàn)條件要求比較苛刻和對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求嚴(yán)格和等情況。此時(shí)，假病毒技術(shù)是一種非常有效的研究手段。

在對(duì)病毒進(jìn)行研究的過程中，準(zhǔn)確評(píng)價(jià)病毒感染后體內(nèi)中和抗體反應(yīng)不僅對(duì)確診具有重要價(jià)值，而且對(duì)研究免疫保護(hù)相關(guān)性較為重要。中和抗體也是病毒消除、疾病預(yù)后以及疫苗效果評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。關(guān)于中和抗體的解釋，網(wǎng)上有資料報(bào)道中和抗體是由適應(yīng)性免疫應(yīng)答細(xì)胞分泌的一種可溶性蛋白, 能夠與病原體表面的抗原結(jié)合。病毒入侵人體后，免疫細(xì)胞把中和抗體分泌到血液中，后者與血液里的病毒顆粒結(jié)合，從而阻止病毒黏附靶細(xì)胞受體，這樣病毒就被「中和」掉了。

由于 HPV 難以在體外大量培養(yǎng),目前 HPV 中和抗體檢測(cè)方法主要是依賴于假病毒的檢測(cè)。世界衛(wèi)生組織(WHO)在其 HPV 疫苗指南中指出中和抗體是評(píng)價(jià) HPV 預(yù)防性疫苗免疫保護(hù)效果的金標(biāo)準(zhǔn)。與傳統(tǒng)的免疫原性檢測(cè)方法ELISA相比，假病毒體外中和試驗(yàn)和ELISA方法的檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性。如有研究者比較了兩種重組人乳頭瘤狀病毒52型(HPV52)免疫原性檢測(cè)方法的相關(guān)性，分別采用假病毒體外中和試驗(yàn)(pseudovirus based neutralization assay,PBNA)及酶聯(lián)免疫吸試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)免疫后小鼠血清中HPV52型中和抗體滴度,比較兩種檢測(cè)方法的相關(guān)性^[1]。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用PBNA法檢測(cè)的HPV52型中和抗體滴度與ELISA法檢測(cè)的抗體滴度具有較高的相關(guān)性。

抗體滴度用來衡量某種抗體（antibody)識(shí)別特定抗原決定部位(epitope)所需要的最低濃度（也即最大稀釋度)。一般表示為仍能產(chǎn)生陽性結(jié)果的最大稀釋度。通常通過ELISA方法來檢測(cè)抗體滴度。在HPV預(yù)防性疫苗臨床試驗(yàn)中用于抗體滴度檢測(cè)的方法主要有直接ELISA法、單表位競(jìng)爭(zhēng)ELISA法和假病毒法等。直接ELISA法具有檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、適于進(jìn)行高通量檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。美迪西提供免疫原性檢測(cè)服務(wù)，主要使用小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物做免疫原性毒性試驗(yàn)。

假病毒技術(shù)是近幾年興起的一種研究基礎(chǔ)病毒學(xué)的新型手段，假病毒是指一種反轉(zhuǎn)錄病毒，能夠整合另外一種不同種類病毒的包膜糖蛋白，從而形成具有外源性病毒的包膜，而基因組保持著反轉(zhuǎn)爿乏病毒本身基因組特性的病毒.目前國(guó)內(nèi)外已經(jīng)建立了多種假病毒體系，如HIV、SARS和HCV等，被廣泛應(yīng)用于研究病毒與宿主細(xì)胞的相互關(guān)系、鑒定病毒受體、測(cè)定患者體內(nèi)中和抗體的效價(jià)等諸多方面. 假病毒技術(shù)被廣泛應(yīng)用于中和抗體效價(jià)的評(píng)價(jià)以及抗病毒藥物的篩選中。

假病毒體外中和試驗(yàn)在疫苗研發(fā)中的應(yīng)用有很多如有研究者通過構(gòu)建SARS假病毒而建立一套完整的SARS體外中和試驗(yàn)檢測(cè)體系,還有研究者對(duì)人乳頭瘤病毒假病毒中和抗體檢測(cè)方法在疫苗臨床樣本檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)HPV 假病毒中和抗體檢測(cè)方法具有較好的特異性、準(zhǔn)確性、精密度和耐用性,可以應(yīng)用于 HPV 疫苗臨床血清樣本的免疫原性評(píng)價(jià)。也有研究者構(gòu)建了H5N1 AIV假病毒，為評(píng)價(jià)血清的中和活性以及進(jìn)一步篩選單克隆中和抗體搭建了高效、安全的基礎(chǔ)平臺(tái)。

然而假病毒法存在檢測(cè)周期長(zhǎng)，影響因素很多等問題，因此要將其應(yīng)用于臨床試驗(yàn)中需要對(duì)其進(jìn)行充分的方法學(xué)驗(yàn)證，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。

[1] 兩種重組人乳頭瘤病毒52型免疫原性檢測(cè)方法相關(guān)性的比較[J].