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數(shù)字PCR-外泌體相關腫瘤分子標志物篩查

瀏覽次數(shù):2311 發(fā)布日期:2019-12-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
近幾年外泌體研究的熱度以及文章數(shù)量一直居高不下。人體幾乎所有類型的細胞都能分泌外泌體,它是一種直徑為 30~150 nm 的小囊泡,外泌體廣泛存在并分布于各種體液中,攜帶多種蛋白質、RNA成分(編碼RNA、非編碼RNA)和脂類物質等。外泌體作為重要的傳遞信號分子,形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統(tǒng),參與免疫應答、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲、促血管新生等生理過程,與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關。
目前,越來越多的研究人員將外泌體與轉化醫(yī)學聯(lián)系起來,特別是在液體活檢方面,外泌體的研究將會為疾病的診斷與治療帶來重大改變。
由于外泌體的來源、結構和內含物等特性,研究人員可以從體液中獲取外泌體作為早期疾病診斷的依據(jù)以及評估藥物治療效果。外泌體用于液體活檢具有很大優(yōu)勢,一方面,外泌體比CTC或循環(huán)cfDNA能更早診斷出癌癥,CTC和cfDNA只有在癌癥發(fā)展到一定程度后才增多。另一方面,外泌體檢測還避免了傳統(tǒng)組織活檢對患者造成的不適及損傷。此外,幾乎所有體液均可作為活檢的生物材料,因此能夠保證外泌體來源。針對各種疾病的早期診斷方法將也有望投入實際應用。
 
 
在一些分析中,研究人員發(fā)現(xiàn),檢測體液中的外泌體,能鑒別出實體瘤特異的蛋白靶點,血清中的外泌體也帶有膠質母細胞瘤相關的miRNA和mRNA突變。此外,通過分析外泌體miRNA,研究人員找到了肝癌、肺癌、前列腺癌、結直腸癌等等一系列疾病的標志物,如下圖所示。
 
外泌體miRNA-1247-3p促進肝癌肺轉移
(Tumor-derived exosomal miR-1247-3p induces cancer-associated fibroblast activation to foster lung metastasis of liver cancer www. Nature communications)。
肺癌相關外泌體miRNA參與癌癥期間免疫系統(tǒng)的調控
(The Potential Biomarkers and Immunological Effects of Tumor-Derived Exosomes in Lung Cancer. Front. Immunol.)
 
在外泌體中尋找腫瘤分子標志物,通常的研究思路如下:
 
    在對篩選得到的差異分子進行再次驗證時,數(shù)字PCR憑借其一系列優(yōu)勢獲得了廣泛的認可。
數(shù)字PCR可以提供比qPCR更精準的核酸定量,直接讀取陽性信號,通過泊松分布校正得到目標基因的絕對拷貝數(shù)。并具有檢測周期短,靈敏度和精確度高等特點。該技術是目前最適合用于體液樣品(如血液、尿液、糞便、痰液、胸腹水、腦脊液等)中痕量核酸標記物檢測的方法,數(shù)字PCR能夠有效對二代測序等實驗結果進行驗證。
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