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牛晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒試劑的準備

瀏覽次數(shù):4970 發(fā)布日期:2019-5-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

牛晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒試劑的準備
1)標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

牛晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒操作步驟
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。

牛晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到精確的結(jié)果。

牛晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒試劑盒性能

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