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生物量監(jiān)測(cè)在微生物(細(xì)胞)培養(yǎng)條件優(yōu)化的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):6924 發(fā)布日期:2018-11-26  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

      上一篇推文,介紹了WIGGENS的CGQ生物量在線監(jiān)測(cè)系統(tǒng),在微生物(細(xì)胞)效能評(píng)價(jià)/菌種篩選的應(yīng)用。
      本期介紹生物量監(jiān)測(cè)在微生物(細(xì)胞)培養(yǎng)條件優(yōu)化中的應(yīng)用。培養(yǎng)基為微生物(細(xì)胞)的生長(zhǎng)提供環(huán)境條件以及碳源,氮源,生長(zhǎng)因子等。培養(yǎng)基具有通用性,但每種培養(yǎng)物都有特殊性。在通用培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上針對(duì)培養(yǎng)物的特性做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整或成分添加,對(duì)目的產(chǎn)物的高效產(chǎn)出,具有重要正作用。
      下圖是德國(guó)法蘭克福歌德大學(xué),
使用CGQ生物量監(jiān)測(cè)系統(tǒng)對(duì)Saccharomyces cerevisiae (一種釀酒酵母)在不同碳源組分中的生長(zhǎng)曲線。

 

    三種碳源Glc(葡萄糖)、Gal(半乳糖)、Mal(酰胺)不同濃度對(duì)釀酒酵母的生長(zhǎng)有著明顯的影響,對(duì)遲緩期和對(duì)數(shù)期的影響顯著。碳源各組分濃度不同,對(duì)釀酒酵母進(jìn)入平臺(tái)期的時(shí)間甚至有超過(guò)6小時(shí)的差距影響。這對(duì)注重效率的工業(yè)發(fā)酵來(lái)說(shuō),減少遲緩期的時(shí)間段,有著重要的參考意義。
      下圖是,在M9培養(yǎng)基中,通過(guò)加入不同濃度的甘油,Escherichia coli (大腸桿菌)的生長(zhǎng)曲線
 

   

  從上圖大腸桿菌的生長(zhǎng)曲線可以看出,在M9培養(yǎng)基中,甘油濃度是對(duì)大腸桿菌最終生長(zhǎng)量的最大影響因素。0.4%的甘油濃度對(duì)比0.1%的甘油濃度,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期有明顯提升,最終得到的生物量也是低濃度甘油的4倍以上。
下圖是通過(guò)培養(yǎng)過(guò)程的搖瓶補(bǔ)液,CGQ進(jìn)行的實(shí)時(shí)生物量監(jiān)測(cè)。
 


 

      在大腸桿菌培養(yǎng)中,通過(guò)LIS搖瓶補(bǔ)液系統(tǒng),在搖瓶培養(yǎng)過(guò)程中進(jìn)行在線補(bǔ)入緩沖液,緩沖液對(duì)pH值進(jìn)行了調(diào)節(jié)。在使用LB培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌的過(guò)程中,對(duì)生物量的限制的最大因素不是培養(yǎng)基組分,而是pH值,持續(xù)的進(jìn)行pH調(diào)節(jié),可以有效的增加生物量,提高培養(yǎng)基的利用率。

更多的CGQ生物量監(jiān)測(cè)應(yīng)用,請(qǐng)參考如下文獻(xiàn):

[1]Tripp et al (2017):Establishing a yeast-based screening system for discovery of human GLUT5inhibitors and activators (Nature – Scientific Reports)

[2]Bruder, S. &Boles, E. (2017): Improvement of the yeast based (R)-phenylacetylcarbinol productionprocess via reduction of by-product formation (Biochemical EngineeringJournal).

[3]Gottardi et al. (2017):De novo biosynthesis of trans -cinnamicacidderivatives in Saccharomycescerevisiae (AppliedMicrobiology and Biotechnology).

[4]Bracharz et al. (2017):The effects of TORC signal interference on lipogenesis in theoleaginous yeast Trichosporonoleaginosus (BMCBiotechnology). 

[5]Bruder et al. (2016):Parallelised onlinebiomass monitoring in shake flasks enables efficient strain and carbon sourcedependent growth characterisation of Saccharomycescerevisia (MicrobialCell Factories).

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