關(guān)鍵詞：奶粉；香蘭素；乙基香蘭素； GC-FID
Key words：milk powder; Vanillin; Ethyl vanillin; GC-FID

摘要

以二氯甲烷為溶劑，提取奶粉中的香蘭素和乙基香蘭素，經(jīng)分散固相萃取方法凈化后，用Trace1310氣相色譜儀測(cè)定，外標(biāo)法定量，線性良好，回收率和重現(xiàn)性均滿足分析要求。

引言

香蘭素（vanillin），又叫香草醛，學(xué)名3-甲氧基-4-羥基苯甲醛；乙基香蘭素（ethyl vanillin），學(xué)名3-乙氧基-4-羥基苯甲醛。兩者均為白色或微黃色結(jié)晶粉末，微溶于水，具有香莢蘭香氣及濃郁的奶香，是重要的食品添加劑，廣泛用作食品、飲料以及日化用品等的增香劑。但是，大劑量使用香蘭素等香料將有害健康。根據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用規(guī)定》GB2760-2011要求，凡使用范圍涵蓋0至6個(gè)月嬰幼兒配方食品不得添加任何食用香料。 2012年7月有報(bào)道稱(chēng)，幾大洋品牌的I段奶粉被檢出添加了國(guó)家禁止的香蘭素，因此需要建立相關(guān)檢測(cè)方法對(duì)奶粉中的香蘭素進(jìn)行檢測(cè)。

目前關(guān)于香蘭素和乙基香蘭素的測(cè)定方法主要有分光光度法、電化學(xué)法、高效液相色譜法、氣相色譜和氣質(zhì)聯(lián)用法，由于HPLC法對(duì)樣品凈化程度要求不高，因此樣品預(yù)處理方面的研究較少。本方法采用二氯甲烷提取，分散固相萃取凈化，建立同時(shí)測(cè)定嬰幼兒配方奶粉中香蘭素和乙基香蘭素含量的氣相色譜法。

實(shí)驗(yàn)部分

主要儀器設(shè)備與試劑

儀器：氣相色譜儀， Trace 1310，美國(guó)ThermoFisher。
試劑：二氯甲烷，色譜純；氯化鈉，分析純；Cleanert C18固體吸附劑；香蘭素和乙基香蘭素標(biāo)準(zhǔn)品。

樣品前處理方法

稱(chēng)取5 g奶粉（精確到0.01 g）于100 mL容量瓶中，加入20 mL水，振蕩，使成為均勻奶液，加水定容至刻度，搖勻。用移液管移取5 mL奶液于15 mL離心管中，加入2 g NaCl， 5 mL二氯甲烷，蓋好蓋子振蕩提取5 min，靜置2 min，然后以10000 rpm離心5 min，小心全部移取下層有機(jī)層，過(guò)無(wú)水硫酸鈉后，定容至5 mL，加入150 mgC18吸附劑，渦旋1 min，靜置后吸取上層清液過(guò)0.2 μm濾膜，待氣相色譜儀測(cè)定。

樣品的測(cè)定

上述得到的樣品溶液直接進(jìn)樣，氣相色譜儀檢測(cè)，外標(biāo)法定量。儀器參數(shù)設(shè)置見(jiàn)表1.

結(jié)果與討論

標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖和線性

標(biāo)準(zhǔn)樣品中香蘭素和乙基香蘭素的色譜圖如圖1所示。用標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成濃度分別為1 μg/mL, 2.5 μg/mL,10 μg/mL, 35 μg/mL, 50 μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，進(jìn)樣1 μL，然后按照以上所述的測(cè)定方法進(jìn)行GC-FID測(cè)定，以標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度為橫坐標(biāo)，以各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到香蘭素和乙基香蘭素的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線如圖2。香蘭素和乙基香蘭素的相關(guān)系數(shù)分別為0.9980和0.9991。

方法的精密度和回收率

對(duì)香蘭素和乙基香蘭素的1 μg/mL， 2 μg/mL， 10 μg/mL三個(gè)水平加標(biāo)樣品分別進(jìn)行了3次測(cè)定，平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差列于表2中。樣品加標(biāo)的色譜圖見(jiàn)圖3。選擇1 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以噪聲的3倍計(jì)算，本方法中香蘭素和乙基香蘭素的檢測(cè)限分別為0.33 μg/mL和0.25 μg/mL。

對(duì)市售4個(gè)奶粉樣品中香蘭素和乙基香蘭素的測(cè)定

按上述前處理方法測(cè)定了4個(gè)奶粉樣品中的香蘭素和乙基香蘭素含量，其中樣品1為I段奶粉，為禁止添加香蘭素和乙基香蘭素。樣品2、 3、 4為III段奶粉，可以添加香蘭素和乙基香蘭素，允許添加量為5 mg/100 mL，即50 μg/mL。其中100 mL以即食食品計(jì)，即沖調(diào)好的奶液，按照奶粉沖調(diào)說(shuō)明一般為每100 mL水加入14 g奶粉。樣品中的香蘭素和乙基香蘭素的含量采用外標(biāo)法定量，配制一系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量結(jié)果按公式（1）換算為奶液中的含量，列于表3中。

結(jié)論

建立了嬰幼兒配方奶粉中香蘭素和乙基香蘭素的氣相色譜測(cè)定方法。本方法步驟簡(jiǎn)單、快捷，精密度高，具有較好的分離度，雜質(zhì)干擾少，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，靈敏度高，是測(cè)定嬰幼兒配方奶粉中香蘭素、乙基香蘭素的較好的方法。