李春麗 李杰 明紅 賽默飛世爾科技 ( 中國(guó) ) 有限公司

1.前言
鄰苯二甲酸酯類增塑劑是一類增加聚合物樹(shù)脂的可塑性、增強(qiáng)制品柔軟性的助劑，也是迄今為止產(chǎn)量和消費(fèi)量最大的助劑種類，其中鄰苯二甲酸酯類的使用最為廣泛。鄰苯二甲酸鹽由于未聚合到塑料基質(zhì)中，隨著使用時(shí)間的推移，可由塑料中轉(zhuǎn)移到環(huán)境中，造成污染。也可通過(guò)呼吸、飲食和皮膚接觸直接進(jìn)入人體，導(dǎo)致肝腎功能下降，具有致突變性、致癌性。全球已有很多國(guó)家通過(guò)立法限制使用鄰苯二甲酸酯類增塑劑，包括歐盟 REACH 法規(guī)和美國(guó)的《消費(fèi)品安全改進(jìn)法》等。

增塑劑在食品安全引起關(guān)注，首先是 2011 年 5 月起臺(tái)灣食品中先后檢出 DEHP、DINP、DNOP、DBP、DMP、DEP 等 6 種鄰苯二甲酸酯類塑化劑成分，藥品中檢出DIDP。截至6月8日，臺(tái)灣被檢測(cè)出含塑化劑食品已達(dá) 961 項(xiàng)。6 月 1 日衛(wèi)生部緊急發(fā)布公告，將鄰苯二甲酸酯（也叫酞酸酯）類物質(zhì)，列入食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單。

近段時(shí)間，白酒中檢測(cè)出塑化劑的風(fēng)波再次引起大家的關(guān)注，白酒添加塑化劑則有可能是為了讓年份不夠的酒液看起來(lái)好看，增加各種增粘劑可固化偽造糧食酒內(nèi)的糖分，產(chǎn)生粘杯掛杯的效果。但同時(shí)也有可能是白酒產(chǎn)品中的塑化劑屬于特定遷移，主要是生產(chǎn)或包裝過(guò)程中與塑料制品接觸，塑化劑被酒精溶出所造成的。

目前國(guó)內(nèi)頒布了 GB/T 21911-2008《食品中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定》的檢測(cè)方法。本實(shí)驗(yàn)在此標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上，進(jìn)行優(yōu)化，采用水浴加熱去除乙醇后，正己烷提取，采用賽默飛世爾科技全新一代三重四極桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（TSQ 8000）分析檢測(cè)白酒中 16 種鄰苯二甲酸酯的方法。通過(guò)二級(jí)質(zhì)譜掃描充分減少了在復(fù)雜基質(zhì)樣品中的背景干擾影響，提高了目標(biāo)化合物的檢測(cè)靈敏度。

2.實(shí)驗(yàn)部分
2.1 儀器和試劑
  質(zhì)譜儀 : TSQ 8000 質(zhì)譜儀 ( 賽默飛世爾科技，美國(guó) )；
  氣相色譜儀：Trace1310 GC 配 AI l310 自動(dòng)進(jìn)樣器 ( 賽默飛世爾科技，美國(guó) )；
  色譜柱 : TR-PesticideII 30 m* 0.25 mm* 0.25 µm 毛細(xì)管色譜柱（帶 5 m 預(yù)柱）；
  試劑：正己烷，農(nóng)殘級(jí)； 
  白酒：自購(gòu)于超市。

2.2 儀器方法
氣相方法：
  柱溫箱：60ºC 保持 1 min，以 20ºC/min 升至 220ºC，保持1 min，再以 5ºC/min 的速率升至 280ºC，保 持 3 min；
  進(jìn)樣口：不分流進(jìn)樣，不分流時(shí)間：1 min，襯管：惰性不分流（貨號(hào)：453A1925），進(jìn)樣口溫度為 250ºC；載氣：恒流，1 ml/min；
  傳輸線：280ºC

質(zhì)譜方法：
離子源溫度為 250 ºC，采用 Acquisition-Timed 方法，SRM掃描，具體檢測(cè)離子對(duì)如表 1 所示：

3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
3.1 全自動(dòng)二級(jí)質(zhì)譜條件的優(yōu)化（Auto-SRM）
在氣相色譜－三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)過(guò)程中，為了保證定性和定量的準(zhǔn)確，必須對(duì)待測(cè)物的離子對(duì)（母離子和子離子）、碰撞能量、掃描時(shí)間、駐留時(shí)間及監(jiān)測(cè)反應(yīng)離子的數(shù)目等一系列質(zhì)譜參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，以期達(dá)到最佳的靈敏度。使用TSQ 8000 氣質(zhì)聯(lián)用儀，可采用特有的 Auto-SRM 模式，可全自動(dòng)完成所有化合物的二級(jí)質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化，并自動(dòng)給出碰撞能量?jī)?yōu)化結(jié)果，簡(jiǎn)單直觀，如圖 1 所示，大大節(jié)省了分析時(shí)間。

本實(shí)驗(yàn)在固定色譜條件下，通過(guò)優(yōu)化后的儀器參數(shù)，樣品色譜圖與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖比較，保留時(shí)間相對(duì)偏差不超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)±2.5％；采用多離子對(duì)定性，相對(duì)離子豐度最大允許偏差不超過(guò) ±20％，確保了定性的準(zhǔn)確度。

3.2 色譜分離結(jié)果
由于溶劑中可能含有鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)，所以每次做樣前我們都做了溶劑對(duì)照，以便排除溶劑中的干擾效應(yīng)，摒除假陽(yáng)性結(jié)果。由于 16 種鄰苯二甲酸酯的離子對(duì)信息有一些比較相似，所以我們選擇了分離度比較好的弱極性色譜柱，從而保證了 16種鄰苯二甲酸酯在色譜上得以分離，使定性定量更加準(zhǔn)確。16種鄰苯二甲酸酯色譜分離情況如圖 2 所示：

3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線及最低定量限
以正己烷為溶劑，分別配制 1 µg/L，5 µg/L，10 µg/L，50 µg/L，100 µg/L，500 µg/L 的混標(biāo)溶液，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，各化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線如表 2 所示，相關(guān)系數(shù) R 2 均大于 0.991，表明這16 種化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好。由于溶劑本底中部分鄰苯二甲酸酯是存在干擾的。所以需要將標(biāo)準(zhǔn)溶液扣除本底后再計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線，以使標(biāo)準(zhǔn)曲線更加準(zhǔn)確。本次實(shí)驗(yàn)中 16 種鄰苯二鉀酸酯類化合物的最低定量限均為 1 µg/L，見(jiàn)圖 3。其中溶劑中的 DEP、DIBP、DBP 和 DEHP 含量估計(jì)是 1 µg/L 標(biāo)準(zhǔn)品的20-30%，所以最低定量限設(shè)定為 1 µg/L。

3.4 方法精密度和回收率的測(cè)定
稱取白酒樣品，分別添加 2 個(gè)水平濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，選取其中低濃度水平平行測(cè)定 6 次。結(jié)果表明，平均回收率為 81.5- 115%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD, n=6）為 1.74-4.95%�；厥章屎途�密度數(shù)據(jù)結(jié)果見(jiàn)表 3。

表3: 方法的精密度和回收率

3.5 實(shí)際樣品檢測(cè)
按照上述前處理方法，對(duì)市售的 4 種不同的白酒進(jìn)行鄰苯二鉀酸酯類殘留分析檢測(cè)。測(cè)試結(jié)果統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表 4。其中超過(guò)線性范圍的采用二次稀釋后定量。

表 4：實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

對(duì)檢出的化合物可以通過(guò)二級(jí)質(zhì)譜定性離子與定量離子的離子比例進(jìn)一步確證化合物，下圖顯示了樣品 1 中檢出的 DIBP 的離子比例符合標(biāo)準(zhǔn)值，因此可以確證樣品 1 中確實(shí)檢出的是DIBP。

根據(jù) GB9685-2008《食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定，鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)是可用于食品包裝材料的增塑劑，不是食品原料，也不是食品添加劑，嚴(yán)禁在食品、食品添加劑中人為添加。食品、食品添加劑中的鄰苯二甲酸二 (2- 乙基己 ) 酯 (DEHP) 和鄰苯二甲酸二正丁酯 (DBP) 最大殘留量分別為 1.5 mg/kg 和 0.3 mg/kg。我們的樣品測(cè)定結(jié)果表明， DIBP、DBP、DEHP 在白酒中普遍存在，其中1個(gè)樣品中DBP,DEHP的含量超過(guò)規(guī)定，樣品4中 DBP含量達(dá)2.885mg/L即樣品含量為1.154 mg/kg，超標(biāo)285%；DEHP的含量高達(dá)11.606 mg/L 即樣品含量為4.64 mg/kg，超標(biāo) 209%。

4.結(jié)論
本方法采用 ThermoFisher 公司全新一代三重四極桿質(zhì)譜 TSQ 8000 測(cè)定白酒中 16 種鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)殘留，此方法具有操作方便，選擇性好，線性范圍寬，高靈敏度等特點(diǎn)，高靈敏度能夠減少取樣量，極大降低樣品對(duì)質(zhì)譜儀器的污染，節(jié)約了分析和維護(hù)成本。同時(shí) TSQ 8000 提供的離子對(duì)掃描可以有效排除假陽(yáng)性的干擾，使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。在 100、20 µg/L 兩個(gè)添加水平下，回收率為 81.5-115%，20 µg/L 濃度水平下相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD, n=6）為 1.74-4.95%。該方法最低定量限為1 µg/L，完全可以滿足白酒中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)的檢測(cè)需要。