大鼠敞箱實(shí)驗(yàn)/曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)

一.基本原理

動(dòng)物進(jìn)入敞箱后因其對(duì)新異環(huán)境的恐懼而主要在敞箱內(nèi)靠周邊的區(qū)域活動(dòng)，在中央?yún)^(qū)域的活動(dòng)較少。然而，動(dòng)物的探究特性又促使其產(chǎn)生在中央?yún)^(qū)域活動(dòng)（包括運(yùn)動(dòng)、飲水或進(jìn)食）的動(dòng)機(jī)，因而形成沖突狀態(tài)。抗焦慮劑（如地西泮）可解除這種沖突狀態(tài)，表現(xiàn)為在不改變活動(dòng)計(jì)數(shù)的劑量明顯增加大鼠進(jìn)入敞箱中央?yún)^(qū)域的次數(shù)及在中央?yún)^(qū)域逗留的時(shí)間（Stefanski法）或增加大鼠在中央?yún)^(qū)域的飲水時(shí)間（Stout-weiss法），致焦慮劑（如FG7142）則使飲水時(shí)間明顯減少。

二.操作步驟

Stefanski法：實(shí)驗(yàn)裝置為一圓形敞箱，直徑80cm，高30cm；敞箱底部中央劃有直徑分別為35cm和50cm的內(nèi)外兩個(gè)圓圈，內(nèi)圈所包含的區(qū)域?yàn)橹醒雲(yún)^(qū)；靠近底部的側(cè)壁上對(duì)稱(chēng)裝有3個(gè)光電管，并可通過(guò)畢露電視觀察老鼠的活動(dòng)情況。實(shí)驗(yàn)在弱光照明、65dB的白噪聲(背景聲)下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)用雄性Wistar大鼠，體重200-240g。將大鼠置于敞箱中央，觀察10min內(nèi)大鼠總的活動(dòng)計(jì)數(shù)、進(jìn)入敞箱外圈的次數(shù)（從敞箱周邊向中央?yún)^(qū)域運(yùn)動(dòng)約為15cm為一次）和在敞箱中央?yún)^(qū)域逗留的時(shí)間。

Stout-weiss法：（敞箱飲水實(shí)驗(yàn)，the open field drink test，OFDT），實(shí)驗(yàn)用一36cm*36cm*36cm的透明有機(jī)玻璃箱，其底部漆成黑色，頂部敞開(kāi)（此實(shí)驗(yàn)儀器可由上海欣軟信息科技有限公司提供）。箱子的中煙倒著懸掛一水瓶，瓶嘴離地10cm；箱的上方離地面60cm處有一25w的白熾燈用于照明。除一面外，箱體其余三面都用黑色隔板遮擋，以排除額外的的可見(jiàn)刺激。實(shí)驗(yàn)前至少三天每天撫摸大鼠1min，以減少非特異性應(yīng)激對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響；實(shí)驗(yàn)前3天每天僅飲水1h（下午3：00-4:00）。實(shí)驗(yàn)時(shí)將大鼠置于敞箱中央，觀察10min內(nèi)大鼠開(kāi)始飲水的潛伏期、飲水時(shí)間（主要指標(biāo)）、靠近水瓶的次數(shù)及站立數(shù)等。

三 .注意事項(xiàng)與評(píng)價(jià)

（1）在每只大鼠實(shí)驗(yàn)后，用5%的醋酸水溶液徹底清潔實(shí)驗(yàn)箱，以防止嗅覺(jué)暗示傳遞給下一只大鼠。

 (2)敞箱實(shí)驗(yàn)由于其設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便，在行為研究中使用非常普遍，多用來(lái)評(píng)價(jià)動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)活性等綜合行為。而作為焦慮模型只是近幾年才發(fā)展起來(lái)的，所獲得的實(shí)驗(yàn)資料有限。因此，其穩(wěn)定性及可靠性還有待進(jìn)一步驗(yàn)證，最好結(jié)合其它焦慮模型評(píng)價(jià)藥物的效應(yīng)。值得注意的是，丁螺環(huán)酮盡管在其它許多模型上不敏感，但在本實(shí)驗(yàn)中0.3mg/kg即有抗焦慮作用。