奧林巴斯生物顯微鏡使用貼士——覆蓋差

奧林巴斯生物顯微鏡的光學系統(tǒng)也包括蓋玻片在內(nèi)。由于蓋玻片的厚度不標準，光線從蓋玻片進入家空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變，從而產(chǎn)生了象差，這就是覆蓋差。覆蓋差的產(chǎn)生影響了顯微鏡的成象質(zhì)量。

國際上規(guī)定，奧林巴斯生物顯微鏡中蓋玻片的標準厚度為0.17mm，允許范圍在0.16～0.18mm，在物鏡的制造上己將此厚度范圍的象差計算在內(nèi)。物鏡外殼上標刻的0.17，即是表明該物鏡要求蓋玻片厚度。

由于制作技術(shù)等原因，奧林巴斯生物顯微鏡中蓋玻片厚度可能在0.16以下或0.18以上，因而就會帶來覆蓋差。蓋玻片太厚，不該進入物鏡的光線會進入物鏡；蓋玻片太薄，則應該進入物鏡的光線卻不能進入。

奧林巴斯生物顯微鏡中放大倍率愈高，NA值愈大，覆蓋差愈明顯，尤以蓋玻片厚，覆蓋差更為嚴重。

在奧林巴斯生物顯微鏡中消除覆蓋差最理想的辦法，是用帶校正環(huán)的物鏡來調(diào)節(jié)。這種物鏡常為40times干燥系物鏡。老式顯微鏡可以用改變鏡筒長度來調(diào)節(jié)，蓋玻片過厚，可以將鏡筒縮短；過薄，可將鏡筒相應拉長。但這是消極的方法，因鏡筒長度改變，放大率也隨之改變，同時也影響成象質(zhì)量。因此不適用研究用顯微鏡。

油浸系物鏡不存在覆蓋差問題，這是由于油和蓋玻片的折射率都在1.52左右，因而形成均勻的光學系統(tǒng)。但是使用油鏡時，奧林巴斯生物顯微鏡中蓋玻片太厚，超過了工作距離，則無法調(diào)焦，甚至看不到圖象。

有的物境上標有"-"符號，一般為低倍物鏡（0.5times、0.75times、1times、2times），其NA值很低，不受蓋玻片的影響，這種物鏡可加也可不加蓋玻片；有的物鏡上標有"0”符號，為不能加蓋玻片的物鏡，叫“無罩物鏡”。

在奧林巴斯生物顯微鏡中物鏡數(shù)值孔徑越大，允許蓋玻片厚度誤差的范圍愈小，也說明越是高倍物鏡對蓋玻片厚度的要求越嚴格。