摘要：采用國際通用的高架十字迷宮焦慮動物模型(EPM)，從行為學角度觀察了四個不同給藥劑量酸棗仁湯對EPM大鼠的抗焦慮作用。結(jié)果顯示，酸棗仁湯確有抗焦慮作用，但此效應(yīng)不隨給藥劑量的增加而增強與一般化學藥物所遵循的量效關(guān)系規(guī)律不同。

酸棗仁湯是臨床治療肝血不足、虛熱內(nèi)擾之“虛勞虛煩不得眠”的著名古方，有關(guān)本方藥理實驗方面的研究目前多局限于鎮(zhèn)靜催眠作用的初步觀察⋯。針對本方l臨床可用于治療焦虛癥的經(jīng)驗事實 ，本文采用國際上通用的焦慮動物模型——1'Ile elevated pluS-maze test(EPM，高架十字迷宮模型)，從行為學角度觀察了酸棗仁湯的抗焦慮作用，并對其量效關(guān)系特點進行了初步總結(jié)。

1 材料

1．1 動物健康雄性Wistar大鼠90只，級別SPF／VAF，體重180±10g，許可證號：SCXK(京)2002．0003，北京維通利華實驗動物中心提供。所有動物提前一周購入，本實驗室常規(guī)飼養(yǎng)。
1．3 行為學測試儀器大鼠高架十字迷宮(EPM)：采用國際通用方法制作 。由兩個相對的開放臂(open aim，長X寬分別為50cm X 10cm)、兩個相對的封閉臂(enclosed arm，close aITI1，長X寬×高分別為50cm×10cm×40cm)、一個連接四只臂的中央平臺(central platform，10cm×10cm)(即：開放臂一中央平臺一開放臂或封閉臂一中央平臺一封閉臂，此二者互相垂直成為“十”(plus)形狀)和圍繞在開放臂邊緣的1cm高的矮擋板組成(目的是防止動物在探究過程中不慎滑下迷宮)。本迷宮由國產(chǎn)有機玻璃制作(1cm厚)，除四個臂的底板及中央平臺為黑色外，其余部位均為無色透明。有機玻璃部分整體固定于(由黑色等長寬的“十”木架和不銹鋼可升降底座組成的)支架上，使迷宮底板調(diào)節(jié)到距實驗室地面50cm處。

2 方法

2．1 動物處置及分組 大鼠每籠7～8只，不限食水。光照節(jié)律12L：12D(6：00～18：00)，室溫(18±2)℃ ，保持安靜。將大鼠隨機分為空白對照、DZP、SZRT I、II、m、IV共6組，每組15只。其中中藥I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別按3．75g／kg／d、7．5g／kg／d、15g／kg／d、30g／kg／d給予SZRT灌胃，DZP組給予1mg／kg灌胃，空白對照組灌服等容積的生理鹽水。各組連續(xù)給藥10d，于第10d在末次給藥2h后8：o0～14：00Am做行為測試。所有動物均提前2h進入測試實驗室。酸棗仁湯對高架十字迷宮大鼠行為學影響的量效關(guān)系評價

2．2 行為學測試

2．2．1 測試條件 實驗室內(nèi)光線昏暗(以1．5m距離處能區(qū)分大鼠細微活動的最低亮度為準)并保持恒亮，室溫20~C左右，保持安靜。測試箱放置于實驗室一角，周圍布以2m高黑色單調(diào)背景。實驗過程中有一名人員搬運動物，2名事先經(jīng)過實驗記錄培訓(xùn)但不熟悉分組情況的人員在距離測試箱1．5m處分別觀察記錄動物的活動。2．2．2 測試指標 迷宮測試前將每只大鼠放入一個60cm×60cm×35cm塑料盒中，任其自由探究5min后迅速置于EPM的中央平臺處，使其頭部正對其中一個開放臂，釋放后即開始記錄下述指標：

①進入開放臂次數(shù)(open arln entry，OE)：進入到任一開放臂的次數(shù)，以大鼠四個爪子均進入到臂內(nèi)為準，中途一個爪子從該臂中完全退出則為該次進入活動完成；② 進入開放臂時間(open arln time，OT)：進入開放臂的時間，單位：秒；③ 進入封閉臂次數(shù)(cl0se ariB entry，CE)：進入到任一封閉臂的次數(shù)，以大鼠四個爪子均進入到臂內(nèi)為準；④ 進入封閉臂時間(cl0se arln time，CT)：進入封閉臂的時間，單位：秒；⑤ 向下探究次數(shù)(head—dipping)：大鼠置身于中央平臺或開放臂時，一邊用前爪握住迷宮邊緣一邊把頭部和肩部伸出開放臂的邊緣向迷宮下面探究的行為次數(shù)；⑥ 封閉臂后腿直立次數(shù)(rearing)：大鼠在封閉臂前腿抬起以后腿支持使身體豎立的次數(shù)。由① ～④分別計算出：① 進入開放臂和封閉臂的總次數(shù)(OE+CE)：表示大鼠的運動活力(1ocomotor activitv)：②進入開放臂次數(shù)比例(OE％)：即開放臂進入次數(shù)／(OE+CE)×100％ ；③ 開放臂停留時間比例(OT％)，即開放臂停留時間／(OT十CT)×100％。每只大鼠測試5min。中間用濕布擦拭迷宮，清除糞便，繼用干布擦凈后再進行下一只大鼠的測試。

3 結(jié)果

本研究引入的高架十字迷宮模型，為抗焦慮研究中公認的非條件反射模型。它利用動物對新異環(huán)境的探究特性相對高懸敞開臂的恐懼心理，形成動物的矛盾行為，實驗指標以進入開放臂的百分數(shù)(OE％)和在開放臂停留時間的百分數(shù)(OT％)反映動物的焦慮狀態(tài)，焦慮動物的OE％和OT％明顯降低，經(jīng)典抗焦慮藥物則使兩者升高 ；開放臂和中央平臺區(qū)head—dipping次數(shù)則反映了在非保護區(qū)內(nèi)的探索行為，代表動物對陌生環(huán)境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避 ，與焦慮程度有一定相關(guān)性；開放臂和封閉臂總進入次數(shù)反映動物總的運動能力，封閉臂rearing值也可用來觀察藥物有無鎮(zhèn)靜作用及鎮(zhèn)靜強度，但多年來關(guān)于抗焦慮藥究竟如何影響這兩個指標一直存在爭議。