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鼎昊源全自動轉(zhuǎn)印儀Blotstainer在蛋白免疫印跡上的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):2667 發(fā)布日期:2013-9-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
由于蛋白免疫印跡的步驟操作較為繁瑣,要求精度較高,實(shí)驗(yàn)中一步出現(xiàn)操作失誤就會導(dǎo)致整個實(shí)驗(yàn)的白白浪費(fèi)。并且一抗二抗試劑也比較寶貴,所以采用儀器操作可以降低實(shí)驗(yàn)的風(fēng)險,保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
 
鼎昊源推出的全自動轉(zhuǎn)印儀就是替代人工操作的好選擇,它配有自動移液系統(tǒng),溫控系統(tǒng)和孵育搖床。自動移液系統(tǒng)包括10個管路,相互獨(dú)立,避免交叉感染。溫控系統(tǒng)范圍在4℃到80℃之間,滿足蛋白免疫印跡,核酸分子雜交實(shí)驗(yàn)的孵育溫度。整套系統(tǒng)根據(jù)客戶自定義的操作程序自動完成。為了方便客戶使用,全自動轉(zhuǎn)印儀出廠預(yù)設(shè)了免疫印跡,核酸雜交,原位雜交和免疫組化的自動程序。
    內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)蛋白免疫印跡程序如下:
Step
Task
Time
Action
Buffer
Memo
Execute x times
1
Set temp
 
Off
 
Temperature to RT
 
2
Incubate
00:05
Wash
PBST
Wash membrane
X2
3
Set temp
 
ON, 10℃
 
Temperature 10℃
 
4
Incubate
01:00
Blocking
Block solution
Blocking
 
5
Incubate
02:00
AB-step
Primary antibody
Primary antibody
 
6
Incubate
00:05
Wash
PBST
Wash membrane
X4
7
Incubate
00:30
Sec. antibody
Second antibody
Second antibody
 
8
Set temp
 
Off
 
Temperature to RT
 
9
Wash
00:05
PBST wash
PBST
PBST wash
X10
10
Ready to stain in dark room
 
 
 
 
 
 
 
1、  設(shè)置溫度到室溫
2、  用0.01M PBS洗膜,5min ×2次。
3、  設(shè)置溫度到10℃
4、加入包被液,平穩(wěn)搖動,1hr。
5、加入一抗(按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋,液體必須覆蓋膜的全部),2hr。
6、棄一抗,用0.01M PBS分別洗膜,5min×4次。
7、加入二抗(辣根過氧化物酶偶聯(lián))(按合適稀釋比例用0.01M  PBS稀釋),0.5hr。
8、設(shè)置溫度到室溫
9、棄二抗,用0.01M PBS洗膜,5min×10次。
10、加入顯色液,避光顯色至出現(xiàn)條帶時放入雙蒸水中終止反應(yīng)。
 
全自動轉(zhuǎn)印儀在上述程序中可以實(shí)現(xiàn)在蛋白免疫印跡孵育過程中的溫控,更加保證一抗二抗的活性,這是一般手工操作所達(dá)不到的。
整套程序5個小時內(nèi)自動完成,不需要人工換液和取出薄膜。當(dāng)然上述程序可以按照用戶實(shí)際需要來調(diào)整全自動轉(zhuǎn)印儀的程序。
來源:鼎昊源(天津)生物科技有限公司
聯(lián)系電話:010-58650065
E-mail:chenyajing@herosbio.com

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