細(xì)胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase，簡稱COX)是一種異源寡聚酶，通常含有13個亞基，定位于線粒體內(nèi)膜，是線粒體呼吸鏈的酶復(fù)合物。細(xì)胞色素c氧化酶中形成催化中心的3個最大的亞基由線粒體DNA編碼，其余10個亞基包括COX IV由細(xì)胞核內(nèi)的基因組DNA編碼。細(xì)胞色素c氧化酶(COX)活性缺陷和人類多種疾病相關(guān)。COX IV抗體可用作線粒體蛋白上樣量的內(nèi)參抗體，其檢測目標(biāo)蛋白大小為16kD左右。

什么時候選擇線粒體內(nèi)參抗體？

我們知道，在Western Blotting中使用內(nèi)參其實就是在WB過程中的另外用內(nèi)參對應(yīng)的抗體檢測內(nèi)參蛋白，這樣在檢測目的產(chǎn)物的同時可以檢測內(nèi)參的表達(dá)，由于內(nèi)參在各組織和細(xì)胞中的表達(dá)相對恒定，借助檢測每個樣品內(nèi)參的量就可以用于校正上樣誤差，這樣半定量的結(jié)果才更為可信。此外使用內(nèi)參可以作為空白對照，檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否完全、整個Western Blot顯色或者發(fā)光體系是否正常。

常用的細(xì)胞總蛋白質(zhì)內(nèi)參有GAPDH和細(xì)胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。對于一些植物的樣本，則需要特別的植物Actin蛋白作為內(nèi)參。當(dāng)實驗樣品中只是核蛋白，而不是細(xì)胞總蛋白提取液時，可以用組蛋白H（Histone H），或者增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）等為核內(nèi)參抗體。而在一些特別的針對線粒體作為微環(huán)境的研究課題時，需要提取線粒體總蛋白并檢測其中的目標(biāo)蛋白含量，這時候常規(guī)的細(xì)胞總蛋白內(nèi)參就不是很合適，我們推薦使用線粒體總蛋白的內(nèi)參抗體，對于線粒體蛋白的檢測，常用COX IV或VDAC1作為內(nèi)參抗體，這里面COX IV又是被引用最多的線粒體內(nèi)參。COX IV的檢測分子量大約在16kD左右，比較適合用于檢測目標(biāo)蛋白在較大的WB實驗。

我們課題組是做凋亡和線粒體方面研究的，經(jīng)常研究線粒體方面的通道蛋白，一直使用Abbkine的COX IV抗體來做WB，效價挺高的�！�—武漢大學(xué)生科院一客戶

小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外，抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面，也即相當(dāng)于實際應(yīng)用時的稀釋比率。一個效價高的100μl COX IV抗體（假如其WB檢測的稀釋比率是1:4000，最終使用液相當(dāng)于400ml），要比效價低的1ml的COX IV抗體（假如WB檢測的稀釋比率是 1:200，最終使用液相當(dāng)于200ml）性價比更高。因此在選擇抗體的時候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價，即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。

為什么選擇推薦Abbkine品牌的COX IV作為線粒體內(nèi)參抗體？

供應(yīng)COX IV抗體的進(jìn)口品牌有很多，像Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling（CST）、Millipore等都有相關(guān)COX IV抗體提供。但是由于不是專門的標(biāo)簽和內(nèi)參抗體供應(yīng)商，因此在性價比上不是最優(yōu)的選擇， 以Abcam為例，其一支100μl COX IV抗體的RMB報價為￥4418；CST的一支100μl COX IV抗體的報價是￥2997。

另外，一些國內(nèi)的供貨商也能提供分裝的COX IV抗體，但是在品牌和質(zhì)量保障上都有不足。國產(chǎn)分裝的COX IV抗體在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足，并且經(jīng)過分裝以后，其效價也有損失。而原產(chǎn)于國內(nèi)實驗室的GAPDH抗體有些具有較好的檢測活性，但是在應(yīng)用類型上有差距，并且在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制，而國內(nèi)僅有的少量原產(chǎn)抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價比更高，同時也是原裝進(jìn)口品牌的COX IV線粒體內(nèi)參抗體，那 Abbkine可能會是您的一個重要考慮選項之一。我們向您推薦Abbkine的COX IV單克隆內(nèi)參抗體Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2)（貨 號A01060）。

該COX IV抗體為單克隆抗體，克隆號為14Y2。其抗原為KLH偶聯(lián)的兼具種屬通用型和蛋白特異性的COX IV蛋白部分序列。Abbkine的COX IV單克隆抗體（貨號#A02060）產(chǎn)品，其價格比Abcam低65%，只有CST的一半價格�？筛咝У膽�(yīng)用于Western Bloting實驗，作為線粒體總蛋白的內(nèi)參定量。

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一個高效價的抗體不僅影響實驗結(jié)果的靈敏度，還意味著更高的性價比。Abbkine的COX IV線粒體內(nèi)參抗體在常規(guī)的WB實驗里，推薦的起始稀釋比率為1:1000，實際在Abbkine的應(yīng)用中，還有1:5,000甚至更高的稀釋比率，需要根據(jù)客戶具體的實驗條件進(jìn)行進(jìn)行優(yōu)化。

Abbkine還提供1ml大包裝以及更大定制規(guī)格的COX IV線粒體內(nèi)參抗體，非常適合經(jīng)常進(jìn)行線粒體領(lǐng)域免疫學(xué)檢測的實驗需求。為方便客戶的使用， 上述產(chǎn)品，Abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。Abbkine針對中國市場，提供全球化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及保障，如果您在使用過程中有任何問題， 請直接與其當(dāng)?shù)卮�理商艾美捷科技有限公司�?lián)系。