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細(xì)胞培養(yǎng)中的一些經(jīng)驗(yàn)技巧,以及如何選購細(xì)胞培養(yǎng)耗材

瀏覽次數(shù):3009 發(fā)布日期:2013-8-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)瓶制作材料的不同,也有玻璃和塑料之分,這里談一點(diǎn)自己的淺見。不同的細(xì)胞對胰酶的敏感度不一樣,所以在實(shí)驗(yàn)中我們常常會遇到一些細(xì)胞消化半天也沒有起色,導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不斷下滑,直至最后的死亡以至于實(shí)驗(yàn)進(jìn)展的不順利。當(dāng)然,有時(shí)候是可以通過加一些EDTA等來增強(qiáng)胰酶的能力,或者提高胰酶的濃度來實(shí)現(xiàn),在培養(yǎng)一些細(xì)胞過程中,我發(fā)現(xiàn),一些細(xì)胞對玻璃和塑料制品粘附能力不同,如RAW264.7,平滑肌細(xì)胞等,在轉(zhuǎn)換培養(yǎng)瓶之后,可以發(fā)現(xiàn)好消化了很多,并且在回到原制品的培養(yǎng)瓶時(shí)不會改變它的貼壁能力。這里希望有經(jīng)驗(yàn)的戰(zhàn)友可以分享你們的經(jīng)驗(yàn)。

細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從大小來講,細(xì)胞培養(yǎng)瓶約可分為約600ml,250ml,50ml和25ml的,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。600ml 、300ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),50ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。當(dāng)然還有其他如圓形的等,都可根據(jù)個(gè)人愛好和實(shí)驗(yàn)需要自己選擇。

關(guān)于培養(yǎng)板的購買其實(shí)也沒有什么經(jīng)驗(yàn),想說的就是要盡量避免購買國產(chǎn)的培養(yǎng)板,國產(chǎn)的一些培養(yǎng)瓶還可以,但是培養(yǎng)板我們買過很多國產(chǎn)的,確實(shí)效果不是很好,細(xì)胞在里面基本上長的非常非?拇~。所以經(jīng)費(fèi)富余的情況下,這些東西能買進(jìn)口的就買吧。大公司的基本都可以買,BD,Corning等等。這些東西原則上是一次性的,但是我們大部分實(shí)驗(yàn)室根本不可能做到,其實(shí)泡酸,洗干凈再用也沒問題,畢竟我們沒有老外那么富足的經(jīng)費(fèi),所以我們就累點(diǎn)吧,多做點(diǎn)體力活鍛煉一下身體吧。

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