丁娟娟、紀(jì)英華、王冰、蔡麒
沃特世科技（上海）有限公司

摘要
2013年1月，新西蘭牛奶及奶制品被檢測(cè)出含有少量的有毒物質(zhì)雙氰胺，新西蘭政府已經(jīng)下令禁售含有雙氰胺的奶類產(chǎn)品。由于中國(guó)是新西蘭奶制品的出口大國(guó)，所以這一敏感的食品安全問(wèn)題又一次觸動(dòng)了全中國(guó)人民的心。沃特世（Waters^®）公司第一時(shí)間推出完整解決方案，為廣大客戶提供有力的分析手段。二氰二氨（俗稱雙氰胺），縮寫DICY或DCD，是氰胺的二聚體，也是胍的氰基衍生物�；瘜W(xué)式C₂H₄N₄，白色結(jié)晶粉末，可溶于水、醇、乙二醇和二甲基甲酰胺，幾乎不溶于醚和苯。不可燃，干燥時(shí)穩(wěn)定。

分析難點(diǎn)
雙氰胺極性非常大，傳統(tǒng)C₁₈色譜柱及HILIC色譜柱均難以保留，對(duì)于復(fù)雜的奶制品基質(zhì)來(lái)說(shuō)會(huì)與雜質(zhì)共流出，影響分析目標(biāo)化合物的定量和定性。沃特世公司BEH Amide系列色譜柱通過(guò)三鍵鍵合的酰胺基鍵合相，親水作用色譜的原理，使得雙氰胺得到非常好的保留。

實(shí)驗(yàn)方法
一、樣品前處理方法：
取1g奶粉加10mL 1%三氯乙酸溶解并沉淀蛋白，12,000轉(zhuǎn)高速離心10min；取2mL上清液上樣到SepPak^® AC2小柱上（Sep-pak AC2上接30mL儲(chǔ)液器，wat011390），按照如下流程操作。方法回收率91%。

二、儀器方法:
UPLC^® 方法：
儀器： ACQUITY UPLC^®
流動(dòng)相A： 0.05%乙酸水
流動(dòng)相B： 0.05%乙酸乙腈
色譜柱： BEH Amide 2.1×150 mm 1.7 μm
流速： 0.3 mL/min
柱溫： 30℃
進(jìn)樣體積： 5 μL
梯度曲線：

MS參數(shù)：
毛細(xì)管電壓： 3.5 kv
脫溶劑氣溫度： 400 ℃
脫溶劑氣流速： 900 L/hr
碰撞氣流速： 0.2 mL/min

檢測(cè)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，乳制品基質(zhì)即使做過(guò)凈化處理，背景干擾依然很嚴(yán)重，所以在檢測(cè)過(guò)程中開(kāi)啟RADAR功能，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)化合物的干擾及背景基質(zhì)的影響。

 

此圖為同時(shí)檢測(cè)目標(biāo)化合物的多反應(yīng)檢測(cè)通道及基質(zhì)全掃描圖，目標(biāo)化合物雙氰胺出峰時(shí)間背景干擾不明顯，使離子抑制效應(yīng)減到最低。

檢測(cè)利器2——PICs功能（子離子確認(rèn)掃描）
在檢測(cè)目標(biāo)化合物的時(shí)候發(fā)現(xiàn)，物質(zhì)本身分子量小，乳制品中干擾物質(zhì)多，干擾嚴(yán)重，不可避免地會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性的情況，此時(shí)會(huì)選擇高分辨質(zhì)譜進(jìn)行分子量和結(jié)構(gòu)的剖析，沃特世Xevo^®系列串聯(lián)四極桿質(zhì)譜可提供碎片離子信息，使一次進(jìn)樣即可完成化合物的多重定性。

由圖中可以看出，溶劑標(biāo)準(zhǔn)品和奶粉樣品的PICs質(zhì)譜圖中主要碎片離子相同，各碎片離子之間相對(duì)強(qiáng)度比也在誤差范圍內(nèi)，擬合度匹配良好，可以確認(rèn)是陽(yáng)性樣品。這樣對(duì)于只提供兩對(duì)離子對(duì)比的單一定性方法來(lái)說(shuō)多了一種定性功能，使數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確。

結(jié)論
雙氰胺極性非常大，傳統(tǒng)C₁₈色譜柱及HILIC色譜柱均難以保留，而沃特世公司Amide系列色譜柱通過(guò)三鍵鍵合的酰胺基鍵合相，親水作用色譜的原理，使得雙氰胺得到非常好保留。而儀器對(duì)于復(fù)雜基質(zhì)中殘留物的分析又作了更好的詮釋，例如用于實(shí)時(shí)檢測(cè)背景基質(zhì)干擾的RADAR功能及多重定性選擇的PICs功能，都能很好地應(yīng)用在我們的實(shí)際工作中，使我們的工作事半功倍。