Y迷宮的行為學(xué)檢測方法與注意事項(xiàng)

（1） Y迷宮實(shí)驗(yàn)介紹

      Y迷宮主要應(yīng)用于動物的辨別性學(xué)習(xí)，工作記憶及參考記憶的測試。Y迷宮由三個完全相同的臂組成。每個臂盡頭有食物提供裝置，根據(jù)分析動物取食的策略即進(jìn)入各臂的次數(shù)、時(shí)間、正確次數(shù)、錯誤次數(shù)、路線等參數(shù)可以反映出實(shí)驗(yàn)動物的空間記憶能力。相對而言，Y迷宮簡便、可行，相對八臂迷宮來說更加簡單，有一定的實(shí)用性，現(xiàn)常用于學(xué)習(xí)記憶功能評價(jià)。Y迷宮、八臂迷宮這類食物獎賞型迷宮任務(wù)能夠檢測嚙齒類動物與海馬和前額葉腦區(qū)相關(guān)的空間參考記憶和空間工作記憶。當(dāng)動物在迷宮中尋找食物時(shí)，動物需要根據(jù)迷宮周圍的視覺標(biāo)示，記住它已搜尋過的迷宮臂，以避免重復(fù)進(jìn)入同一個臂，從而有效地獲得食物。這種類型的記憶能指導(dǎo)進(jìn)行中的行為，被稱為工作記憶。

Y迷宮實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ陀脕硌芯繃�齒類動物的空間識別記憶能力，這相對于被動回避等實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)在于：這種迷宮利用了嚙齒類動物對新異環(huán)境天然探究的自然習(xí)性，不需要動物學(xué)習(xí)任何規(guī)則來趨利避害，能夠有效地反映出動物對新異環(huán)境的識別記憶能力（Dellu et al, 2000; Dellu et al, 1992; Martin et al, 2003）。

（2） Y迷宮裝置

      Y迷宮用醫(yī)用有機(jī)板制作，內(nèi)外壁貼黑色膠紙。共 3個臂，各個臂夾角 120 度，每一臂尺寸 30 cm×8 cm×15 cm（長×寬×高），在中央處各有一個可移動的隔板，在迷宮各個臂內(nèi)貼上不同幾何圖形，作為視覺標(biāo)記。每個Y迷宮的 3 個臂被隨機(jī)設(shè)為：新異臂（novel arm）、起始臂（start arm）和其他臂（other arm）。新異臂：在實(shí)驗(yàn)的第 1 個階段即訓(xùn)練期時(shí)用隔板擋住，在第 2 個階段即測試期時(shí)打開；起始臂：小鼠進(jìn)入迷宮時(shí)所在的臂。整個實(shí)驗(yàn)過程中起始臂和其他臂都是一直打開，動物可以自由出入。迷宮內(nèi)鋪墊木屑，每次訓(xùn)練或測試結(jié)束后，混勻各個臂里的鋸末，以防動物殘留氣味干擾。迷宮上方 1.5 m處安置攝像鏡頭，全過程錄像。

（3）Y迷宮食物獎賞測試：9:00-12:00

     Y迷宮實(shí)驗(yàn)包含兩個階段，間隔 1h（1 h ITI）。第一個階段為訓(xùn)練期，新異臂被隔板擋住，小鼠由起始臂放入，在起始臂和其他臂中自由活動 10 min，訓(xùn)練結(jié)束后，小鼠被放回飼養(yǎng)籠。1 h 后進(jìn)行第2 個階段實(shí)驗(yàn)。第 2 個階段為檢測期，抽開新異臂隔板，小鼠由起始臂放入，在 3 個臂中自由活動 5 min。錄像記錄 5 min 內(nèi)每只小鼠在各個臂停留的時(shí)間和穿梭次數(shù)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：Y迷宮實(shí)驗(yàn)中，5 min 內(nèi)小鼠在各個臂之間停留的時(shí)間；Y迷宮實(shí)驗(yàn)中，5 min 內(nèi)小鼠在各個臂的穿梭次數(shù)。

注：實(shí)驗(yàn)中，隨機(jī)安排不同動物對應(yīng)的 Y迷宮的起始臂、新異臂和其他臂，但對于同一只小鼠，在迷宮實(shí)驗(yàn)的兩個階段，三個臂是固定的。由于小鼠對該迷宮測試的記憶時(shí)間最長不超過數(shù)小時(shí)，所以該迷宮測試可以在同一只小鼠上反復(fù)進(jìn)行，但兩次實(shí)驗(yàn)需間隔至少1周，并改變?nèi)齻�臂的搭配（Dellu et al, 2000）。評價(jià)空間識別記憶能力可以用小鼠在各個臂停留的時(shí)間作為檢測指標(biāo)，同時(shí)以動物在各個臂的穿梭次數(shù)作為檢測其活動能力的一個指標(biāo)（Dellu et al, 1992，2000）。Y迷宮的行為學(xué)檢測方法

（4） Y迷宮電刺激測試

   Y-迷宮為一個三等臂式反射箱，三臂的夾角為120°，底部為可通電的銅棒，每臂端有一信號燈，燈亮表示安全區(qū)，此臂不通電無電流，另兩臂通電(電壓50 ~ 70 V，大致固定在能使小鼠產(chǎn)生逃避行為的強(qiáng)度)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，隨即變換安全區(qū)，電擊小鼠，以小鼠立即逃往安全區(qū)為一次正確反應(yīng)。具體方法：每只小鼠先在迷宮中適應(yīng) 3 min，每次電擊延遲為5 s，直到小鼠的訓(xùn)練過程中連續(xù)9 次正確反應(yīng)即為學(xué)會。記錄小鼠學(xué)會所需的訓(xùn)練次數(shù)，訓(xùn)練次數(shù)越少，說明學(xué)習(xí)能力越強(qiáng)。2 4 h 后進(jìn)行記憶保持能力的檢測，以正確反應(yīng)次數(shù)占總檢測次數(shù)的百分比表示記憶保持能力(正確反應(yīng)的次數(shù)/總檢測次數(shù)×100%)，此值越高說明記憶力越好。