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鱟試劑選購導(dǎo)讀--細(xì)菌內(nèi)毒素檢測新手指南

瀏覽次數(shù):3253 發(fā)布日期:2009-11-13  來源:www.houshiji.com
鱟試劑選購導(dǎo)讀--細(xì)菌內(nèi)毒素檢測新手指南
  
鱟試劑
 
鱟試劑是從棲生于海洋的節(jié)肢動物“鱟”的藍(lán)色血液中提取變形細(xì)胞溶解物,經(jīng)低溫冷凍干燥而成的生物試劑,專用于細(xì)菌內(nèi)毒素與β-葡聚糖檢測。
 
鱟試劑按原料來源分:
全世界目前有4個種屬的鱟,其中僅有東方鱟(Tachypleus tridentatus Leach) 和美洲鱟(Limulus polyphemus Linnaeus)可制造鱟試劑,對應(yīng)生產(chǎn)出來的鱟試劑分別為東方鱟鱟試劑(Tachypleus Amebocyte Lysate, TAL)和美洲鱟鱟試劑(Limulus Amebocyte Lysate,LAL),TAL與LAL具有相同的功效。
 
鱟試劑按方法分:
 
凝膠法鱟試劑
動態(tài)濁度法鱟試劑
終點(diǎn)濁度法鱟試劑
動態(tài)顯色法鱟試劑
終點(diǎn)顯色法鱟試劑
 
凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來定性檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量,使用時應(yīng)加除熱原水(細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水)復(fù)溶后使用。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應(yīng)的終點(diǎn)。此法操作比較簡單,經(jīng)濟(jì),不需要專用測定設(shè)備,可以進(jìn)行定性或半定量測定。
 
特異性鱟試劑,即棄G因子鱟試劑,是國內(nèi)首創(chuàng)的產(chǎn)品, 它專一對內(nèi)毒素起反應(yīng),避免了G因子旁路的干擾,使檢測結(jié)果更加可靠,在藥檢和臨床檢驗(yàn)方面是不可或缺的理想檢測試劑。
 
動態(tài)濁度法鱟試劑、終點(diǎn)濁度法鱟試劑、動態(tài)顯色法鱟試劑、終點(diǎn)顯色法鱟試劑,這四種方法都是定量檢測內(nèi)毒素的。
 
根據(jù)檢測原理,終點(diǎn)濁度法和動態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化而測定內(nèi)毒素含量的方法。終點(diǎn)濁度法未見商品化產(chǎn)品。動態(tài)濁度法(又稱動態(tài)比濁法)是檢測反應(yīng)混合物的濁度上升某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時間,或是檢測濁度增加速度的方法。
 
終點(diǎn)顯色法和動態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測定內(nèi)毒素含量的方法,根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度,又稱為比色法。廈門鱟試劑廠于2005年推出以鱟四肽為顯色底物的鱟試劑盒,抗干擾能力強(qiáng), 靈敏度高達(dá)0.005EU/ml, 質(zhì)量達(dá)到國際領(lǐng)先水平。目前已有500多家單位使用該試劑盒,并有部分單位發(fā)表相應(yīng)文獻(xiàn)。國內(nèi)有少量國外產(chǎn)品,但價格遠(yuǎn)高于國產(chǎn)試劑,到貨周期長。
 
如果您僅需要檢測樣品的內(nèi)毒素限量,可以選擇凝膠法鱟試劑,通過確定內(nèi)毒素限值及最大有效稀釋倍數(shù),做樣品的干擾試驗(yàn)從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。

如果您需要定量測定樣品中內(nèi)毒素含量則應(yīng)選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動態(tài)濁度法鱟試劑。
 
動態(tài)濁度法與動態(tài)顯色法需要帶溫育系統(tǒng)的動態(tài)光度測定儀器及配套軟件,例如,微板鱟試儀ELx808及軟件TALgent 或Gen5。動態(tài)濁度法與動態(tài)顯色法簡單方便、一步即成,線性范圍寬。
 
終點(diǎn)顯色法需要配套酶標(biāo)儀或可見分光光度計(jì)進(jìn)行檢測。配套帶有溫育系統(tǒng)的酶標(biāo)儀,如微板鱟試儀ELx808,可減少試劑用量。
來源:廈門市鱟試劑實(shí)驗(yàn)廠有限公司
聯(lián)系電話:(0592)2085561
E-mail:yangwenjiu@houshiji.com

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