9999元構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株
百恩維生物提供兩種篩選穩(wěn)定細(xì)胞株的方法:
1、轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后,單克隆方法篩選穩(wěn)定細(xì)胞系。
2、慢病毒感染篩選穩(wěn)定細(xì)胞株。
病毒感染方法較質(zhì)粒轉(zhuǎn)染篩選單克隆方法更方便和高效,是目前主流的穩(wěn)定細(xì)胞系篩選方法。用慢病毒制備穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,由于其高效整合、高效轉(zhuǎn)錄、高效表達(dá)、宿主范圍廣,感染效率高,且與細(xì)胞染色體整合而不發(fā)生基因重排,是制備穩(wěn)定細(xì)胞株的理想載體。
百恩維有著多年構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的經(jīng)驗(yàn),已在H1299、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2、HL7702、SW480、HepG2、SGC-7901、MGC-803、HT-29、Saos-2、U-2os、PC12、SK-BR-3、MCF-7、HMSC-ad 、GIST-T1、HEK293、293T等多個(gè)種屬細(xì)胞中成功構(gòu)建過表達(dá)和RNAi穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株。
實(shí)例:
HMSC-ad穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株 SiHa穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、穩(wěn)定:保證15代以內(nèi)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)。
2、迅速:一般控制在1個(gè)月以內(nèi)完成構(gòu)建。
3、經(jīng)濟(jì):價(jià)格實(shí)惠,性價(jià)比高。
4、質(zhì)量保證:對(duì)外源基因進(jìn)行嚴(yán)格鑒定。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株服務(wù)流程
1、篩選濃度測(cè)定:以 10-14 天細(xì)胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度。
2、細(xì)胞接種:轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前天接種細(xì)胞,各種細(xì)胞的平板密度依據(jù)各種細(xì)胞的生長(zhǎng)率和細(xì)胞形狀而定。進(jìn)行轉(zhuǎn)染當(dāng)天細(xì)胞應(yīng)達(dá)到 60%-80% 覆蓋。
3、細(xì)胞轉(zhuǎn)染:用構(gòu)建好的載體(或包裝好的病毒)轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞。
4、抗生素篩選。
5、鑒定篩選結(jié)果。
客戶需要提供
1、構(gòu)建好的外源基因載體(如果您還沒有外源基因及載體,可以選用百恩維的載體構(gòu)建服務(wù)。)。
2、待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系( 1×106 個(gè)細(xì)胞,可傳代,倍增時(shí)間小于 48 小時(shí)),特殊細(xì)胞需提供培養(yǎng)基。
3、關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)條件的說明。
我們提供
1、構(gòu)建好的穩(wěn)定細(xì)胞株。
2、構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
相關(guān)技術(shù)服務(wù)及產(chǎn)品:
病毒包裝
蛋白表達(dá)與純化
轉(zhuǎn)染試劑